Przejdź do treści
A172 Komórki
Chusteczka
Mózg
Choroba
Glejak wielopostaciowy
Miejsce przerzutów
Miejsce występowania guza pierwotnego (mózg)
Synonimy
A-172, A 172, A-172 MG, A-172MG

Dokumenty

A172 Komórki

Cell line · Numer produktu 300108

A-172 (A172 lub A-172 MG) to ważna linia komórkowa wykorzystywana w badaniach z zakresu neuronauki. Pochodzi z tkanki mózgowej 53-letniego mężczyzny z glioblastomem...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
Wykonane na zamówienie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

A-172 (A172 lub A-172 MG) to znacząca linia komórkowa wykorzystywana w badaniach neurobiologicznych. Pochodzi ona z tkanki mózgowej 53-letniego mężczyzny z glejakiem, rodzajem raka mózgu. Komórki te przylegają i rozprzestrzeniają się na powierzchni naczyń hodowlanych, z kariotypem n = 80 (80 chromosomów). Komórki A-172 są hipertriploidalne, wykazując ponad 20 chromosomów markerowych. Wykazano, że są one nienowotworowe u myszy NIH Swiss poddanych działaniu surowicy antytymocytarnej. Komórki A-172 mają profil ekspresji genów, który podkreśla ich linię mezenchymalną i zaangażowanie w angiogenezę.

Wyrażają geny związane z markerami mezenchymalnymi (CD90, CD105, białko aktywacji fibroblastów, tenascyna C) i induktorami angiogenezy (VEGF, FGF2 (b), TGFb1, trombospondyna-1). Porównanie z linią komórkową T98G ujawnia różnice w morfologii i ekspresji markerów powierzchniowych. Obie linie komórkowe wykazują wysoką ekspresję aktyny mięśni gładkich a2. Zmiana stężenia surowicy płodowej w pożywce hodowlanej wpływa na odsetek komórek wyrażających specyficzne antygeny powierzchniowe, takie jak CD73 i CD105.

Linie komórkowe A-172 i T98G dokładnie reprezentują glejaki, zapewniając cenne narzędzia do badania tego guza mózgu. Ich profile ekspresji genów i cechy morfologiczne pozwalają na badanie mechanizmów molekularnych leżących u podstaw rozwoju i progresji glejaka. Naukowcy mogą wykorzystać komórki A-172, aby uzyskać wgląd w biologię glejaka i potencjalnie zidentyfikować nowe cele terapeutyczne dla tej wyniszczającej choroby.

Chusteczka
Mózg
Choroba
Glejak wielopostaciowy
Miejsce przerzutów
Miejsce występowania guza pierwotnego (mózg)
Zastosowania
Badania nad glejakiem wielopostaciowym; biologia glejaka wielopostaciowego o charakterze mezenchymalnym; badania nad angiogenezą z udziałem VEGF, FGF i TGF-β; inwazja i migracja glejaka; modelowanie glejaka wielopostaciowego z genem IDH1 w typie dzikim; testy wrażliwości na leki; modele przeszczepów heterogenicznych
Synonimy
  • A-172
  • A 172
  • A-172 MG
  • A-172MG

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
Bez GMO
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
No genetic modification; wildtype GBM line with IDH1 wild-type status and MSS phenotype
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonkowego (glejak)
Typ komórki
Komórki glejowe
Status ploidii
Aneuploid
Stan MSI
Stabilny (MSS)
Czas podwojenia
40 godzin

04Identyfikatory

Źródło
A172 (numer katalogowy Cytion 300108)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0131

05Ekspresja i podatność

Profil mutacji
Nie ma mutacji IDH1

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 5
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2 spowoduje powstanie zlewającej się monowarstwy w ciągu 3 dni.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 4 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 do 48 godzin, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
53 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski