Přejít na obsah
Buňky Capan-2
Tkáň
Pankreas
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
CaPan-2, CAPAN-2, Capan 2, CAPAN 2, Capan2, CAPAN2

Dokumenty

Buňky Capan-2

Cell line · Číslo výrobku 300144

Buněčná linie Capan-2 je lidská buněčná linie adenokarcinomu slinivky břišní, která byla poprvé izolována z nádorové tkáně slinivky břišní 56letého muže kavkazského původu. Jedná se o...

€430.00bez DPH a poštovného
Nízký stav zásob
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie Capan-2 je buněčná linie lidského adenokarcinomu pankreatu, která byla poprvé izolována z nádorové tkáně pankreatu 56letého muže kavkazské rasy. Byla získána z metastatického ložiska v játrech, což naznačuje její původ ze sekundárního nádoru, díky čemuž je obzvláště cenná pro výzkum metastatických procesů a biologie karcinomu pankreatu. Buňky vykazují epiteliální morfologii a byly hojně využívány ke studiu rakoviny slinivky břišní, rezistence na léky a biologie nádorů.

Je známo, že buňky Capan-2 exprimují mutovanou formu virového onkogenu homologu Kirstenova sarkomu potkana (KRAS), což je běžná mutace u rakoviny slinivky břišní, takže jsou vhodným modelem pro studium nádorového bujení řízeného KRAS. Kromě toho se vyznačují expresí mutací nádorového supresorového genu p53 a byla u nich pozorována chromozomální nestabilita, což jsou kritické vlastnosti důležité pro progresi rakoviny a odpověď na léčbu. Tato buněčná linie byla použita v mnoha studiích, včetně studií hodnotících účinnost chemoterapeutik, zkoumajících molekulární cesty progrese rakoviny a vyvíjejících strategie cílené léčby.

Tkáň
Pankreas
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
  • CaPan-2
  • CAPAN-2
  • Capan 2
  • CAPAN 2
  • Capan2
  • CAPAN2

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Polygonální
Tumorogenní
Ano, na nahých myších. Tvoří dobře diferencovaný adenokarcinom odpovídající karcinomu pankreatu
Ploidní stav
Aneuploidní
Doba zdvojnásobení
45 až 60 hodin

04Identifikátory

Citace
Capan-2 (katalogové číslo Cytion 300144)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0026

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
P53 negativní
Exprese antigenu
Krevní skupina B, Rh+
Isoenzymy
Me-2, 2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, produkt fenotypové frekvence: 0.0004
Mutační profil
Buňky Capan-2 nesou heterozygotní mutaci Krasu v kodonu 12: GGT>GTT
Produkty
Mucin (apomucin, MUC-1, MUC-2)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukóza, w: stabilní glutamin, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820200a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2 vytvoří do 7 dnů konfluentní monovrstvu.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 48 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
56 let
Etnická příslušnost
Kavkazský