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COLO-205
Gewebe
Dickdarm, Dukes' Typ D
Krankheit
Kolorektales Adenokarzinom
Metastasenherd
Aszites
Synonyme
Colo 205, CoLo 205, COLO-205, COLO 205, COLO.205, Colo205, COLO205, Co 205, Colorado 205

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COLO-205

Cell line · Artikelnummer 300380

The COLO-205 cell line is a human colorectal adenocarcinoma cell line first established from the metastatic site of the ascites in a 70-year-old Caucasian...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die COLO-205-Zelllinie ist eine humane kolorektale Adenokarzinom-Zelllinie, die ursprünglich aus dem metastasierenden Aszites eines 70-jährigen kaukasischen Mannes gewonnen wurde. Diese Zelllinie, die sich durch ihre epitheliale Zellmorphologie auszeichnet, wird häufig in der biomedizinischen Forschung im Bereich Darmkrebs eingesetzt, insbesondere in Studien zur Krebsbiologie, zum Ansprechen auf Medikamente und zu Metastasierungsmechanismen. COLO-205-Zellen weisen einen hyperdiploiden Karyotyp auf und sind dafür bekannt, dass sie mäßig gut differenzierte Adenokarzinome bilden, wenn sie in immundefiziente Mäuse xenotransplantiert werden.

COLO-205-Zellen exprimieren mehrere wichtige onkogene und tumorsuppressive Signalwege, was sie zu einem wertvollen Modell für pharmakologische Tests und die Krebsforschung macht. Sie reagieren auf den Tumor-Nekrose-Faktor-bezogenen Apoptose-induzierenden Liganden (TRAIL) und eignen sich daher für Apoptose-Studien. Darüber hinaus wurden diese Zellen ausgiebig zur Untersuchung der Pharmakodynamik verschiedener Chemotherapeutika eingesetzt, was Einblicke in die Wirkungs- und Resistenzmechanismen der Darmkrebstherapie ermöglicht. Die Forschung mit der COLO-205-Linie hat wesentlich zum Verständnis des für kolorektale Adenokarzinome typischen biologischen Verhaltens beigetragen, einschließlich der zellulären Proliferation, Differenzierung und Interaktion mit Krebsmedikamenten.

Gewebe
Dickdarm, Dukes' Typ D
Krankheit
Kolorektales Adenokarzinom
Metastasenherd
Aszites
Synonyme
  • Colo 205
  • CoLo 205
  • COLO-205
  • COLO 205
  • COLO.205
  • Colo205
  • COLO205
  • Co 205
  • Colorado 205

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen
Ploidie-Status
Aneuploid
MSI-Status
Stabil (MSS)
Verdopplungszeit
20 bis 25 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
COLO-205 (Cytion Katalognummer 300380)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0218

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
CSAp- (Centriole und Spindel-assoziiertes Protein)
Antigenexpression
Die Zellen sind durch Immunoperoxidase-Färbung positiv für Keratin.
Isoenzyme
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1-2, PEP-D, 1
Reverse Transkriptase
Negativ
Produkte
Carcinoembryonales Antigen (CEA) 1,5 bis 4,1 ng/106 Zellen/10 Tage, Keratin, Interleukin 10 (IL-10, Interleukin-10)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Subkultivierung
Suspensionszellen in einem 15-ml-Röhrchen sammeln und die anhaftenden Zellen vorsichtig mit PBS ohne Kalzium und Magnesium spülen (3-5 ml PBS für T25-, 5-10 ml für T75-Zellkulturflaschen). Accutase zugeben (1-2 ml pro T25-, 2,5 ml pro T75-Zellkulturflasche), die Zellschicht muss vollständig bedeckt sein. Bei Raumtemperatur 10 Minuten lang inkubieren, dann die in Suspension wachsenden Zellen und die adhärenten Zellen zusammen zentrifugieren. Die Zellen vorsichtig resuspendieren und in neue Flaschen mit frischem Medium geben.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
70 Jahre