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P3x63Ag8
Gewebe
B-Lymphozyten, Phlogozyten, Myelom
Synonyme
P3x63Ag8, P3-x63-Ag8, P3/x63-Ag8, P3/x63 Ag8, P3/x63/Ag8, P3-x63Ag8, P3x63 Ag8, P3x63 Ag8, P3 x 63Ag8, P3 x 63 Ag8, x63-Ag8, x63-AG8, x63-Ag8, P3x63, x63, GM03571

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P3x63Ag8

Cell line · Artikelnummer 305171

This cell ine is derived from the P3K27 cell line (a tissue culture line from the MOPC-21 plasmacytoma in BALB/c mice). The cells are resistant to 8-azaguani...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung
Diese Zelle stammt von der P3K27-Zelllinie ab (einer Gewebekulturlinie aus dem MOPC-21-Plasmozytom der BALB/c-Mäuse). Die Zellen sind resistent gegen 8-Azaguanin (20 Mikrogramm/ml), aber empfindlich gegen HAT. Aufgrund eines Mangels an 3-Ketosteroid-Reduktase-Aktivität wurden die Zellen als cholesterin- auxotroph bezeichnet. Diese Zelllinie wurde darauf getestet, dass sie nicht mit dem Ektromelie-Virus (Mauspocken) infiziert ist.
Gewebe
B-Lymphozyten, Phlogozyten, Myelom
Synonyme
  • P3x63Ag8
  • P3-x63-Ag8
  • P3/x63-Ag8
  • P3/x63 Ag8
  • P3/x63/Ag8
  • P3-x63Ag8
  • P3x63 Ag8
  • P3x63 Ag8
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  • x63-Ag8
  • x63-AG8
  • x63-Ag8
  • P3x63
  • x63
  • GM03571

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Lymphoblasten
Verdopplungszeit
16 bis 26 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
P3x63Ag8 (Cytion Katalognummer 305171)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_3411

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Immunglobulin, monoklonaler Antikörper
Antigenexpression
H-2d

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Homogenisieren Sie die Zellsuspension im Kolben vorsichtig durch Auf- und Abpipettieren und entnehmen Sie dann eine repräsentative Probe, um die Zelldichte pro ml zu bestimmen. Verdünnen Sie die Suspension mit frischem Kulturmedium auf eine Zellkonzentration von 1 x 105 Zellen/ml und füllen Sie die angepasste Suspension zur weiteren Kultivierung in neue Kolben.
Aussaatdichte
3 bis 5 × 10⁴ Zellen/m²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
BALB/c