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P3x63Ag8
Tessuto
Linfociti B, flogociti, mieloma
Sinonimi
P3x63Ag8, P3-x63-Ag8, P3/x63-Ag8, P3/x63 Ag8, P3/x63/Ag8, P3-x63Ag8, P3x63 Ag8, P3x63 Ag8, P3 x 63Ag8, P3 x 63 Ag8, x63-Ag8, x63-AG8, x63-Ag8, P3x63, x63, GM03571

Documenti

P3x63Ag8

Cell line · Codice prodotto 305171

This cell ine is derived from the P3K27 cell line (a tissue culture line from the MOPC-21 plasmacytoma in BALB/c mice). The cells are resistant to 8-azaguani...

€500.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

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1

01Informazioni generali

Descrizione
Questa cellula deriva dalla linea cellulare P3K27 (una linea di coltura tissutale del plasmocitoma MOPC-21 in topi BALB/c). Le cellule sono resistenti alla 8-azaguanina (20 microgrammi/mL) ma sensibili all'HAT. A causa di una carenza nell'attività della 3-chetosteroide reduttasi, le cellule sono state segnalate come auxotrofiche del colesterolo. Questa linea cellulare è stata testata per non essere infettata dal virus dell'ectromelia (vaiolo dei topi).
Tessuto
Linfociti B, flogociti, mieloma
Sinonimi
  • P3x63Ag8
  • P3-x63-Ag8
  • P3/x63-Ag8
  • P3/x63 Ag8
  • P3/x63/Ag8
  • P3-x63Ag8
  • P3x63 Ag8
  • P3x63 Ag8
  • P3 x 63Ag8
  • P3 x 63 Ag8
  • x63-Ag8
  • x63-AG8
  • x63-Ag8
  • P3x63
  • x63
  • GM03571

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Linfoblasto
Tempo di raddoppio
da 16 a 26 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
P3x63Ag8 (numero di catalogo Cytion 305171)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3411

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Immunoglobuline, anticorpi monoclonali
Espressione dell'antigene
H-2d

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 1 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
Densità di semina
da 3 a 5 × 10⁴ cellule/m²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
BALB/c