
- Ιστός
- Ενδοτράχηλος
- Ασθένεια
- Αδενοκαρκίνωμα
- Θέση μετάστασης
- Θέση πρωτογενούς όγκου (ενδοτράχηλος)
- Συνώνυμα
- HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP #16, HK CRISPR CAP-D3-mEGFP
Έγγραφα
HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP
Cell line · Αριθμός προϊόντος 301573
Η κυτταρική σειρά HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP έχει δημιουργηθεί γενετικά για προηγμένη κυτταρική έρευνα. Προέρχεται από κύτταρα Hela Kyoto και χρησιμοποιεί την τεχνολογία CRISPR/Cas9...
Προσαρμογή / Προτάσεις
- HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFPCell line€800.00
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
01Γενικές πληροφορίες
- Περιγραφή
Η κυτταρική σειρά HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP είναι γενετικά τροποποιημένη για προηγμένη κυτταρική έρευνα. Προέρχεται από τα κύτταρα Hela Kyoto και χρησιμοποιεί την τεχνολογία CRISPR/Cas9 για την επισήμανση του γονιδίου CAP-D3 με μονομερή ενισχυμένη πράσινη φθορίζουσα πρωτεΐνη (mEGFP). Το CAP-D3 είναι ζωτικής σημασίας για τη χρωμοσωμική οργάνωση και τον διαχωρισμό κατά τη διάρκεια της κυτταρικής διαίρεσης. Η ετικέτα mEGFP επιτρέπει την οπτικοποίηση της δυναμικής του CAP-D3 σε πραγματικό χρόνο.
Αυτή η κυτταρική σειρά είναι ένα πολύτιμο εργαλείο για τη μελέτη της χρωμοσωμικής σταθερότητας και ακεραιότητας, ιδίως σε ασθένειες όπως ο καρκίνος. Η φθορίζουσα ετικέτα επιτρέπει την απεικόνιση ζωντανών κυττάρων υψηλής ανάλυσης και τη λεπτομερή ανάλυση του CAP-D3 κατά τη διάρκεια του κυτταρικού κύκλου. Οι ερευνητές μπορούν να χρησιμοποιήσουν αυτό το μοντέλο για μελέτες εντοπισμού πρωτεϊνών και δοκιμές μοριακής αλληλεπίδρασης.
- Ιστός
- Ενδοτράχηλος
- Ασθένεια
- Αδενοκαρκίνωμα
- Θέση μετάστασης
- Θέση πρωτογενούς όγκου (ενδοτράχηλος)
- Εφαρμογές
- Βιολογία του συμπλόκου Condensin II· απεικόνιση της υπομονάδας CAP-D3· οργάνωση και διαχωρισμός των χρωμοσωμάτων· δυναμική της μίτωσης· απεικόνιση ζωντανών κυττάρων· μικροσκοπία φθορισμού υψηλής ανάλυσης· επικύρωση της μεθόδου CRISPR knock-in
- Συνώνυμα
- HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP #16
- HK CRISPR CAP-D3-mEGFP
02Ταξινόμηση
- Οργανισμός
- Άνθρωπος
- Σεξ
- Γυναίκα
- Ιδιότητες ανάπτυξης
- Πιστός
- Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
- GMO-S1
- Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a CRISPR-engineered mEGFP insertion at the CAP-D3 locus for condensin studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- 1
03Χαρακτηριστικά
- Μορφολογία
- Επιθηλιακά κύτταρα με ψηφιδωτό σχήμα πέτρας
- Τύπος κυττάρου
- Επιθηλιακά κύτταρα
04Αναγνωριστικά
- Παραπομπή
- HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP (αριθμός καταλόγου Cytion 301573)
- Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
- 9606
- Κελλοσαύρος
- CVCL_UR44
- Καταθέτης
- Εργαστήριο Ellenberg (EMBL)
05Έκφραση και ευαισθησία
- Προϊόντα
- EGFP (ενισχυμένη πράσινη φθορίζουσα πρωτεΐνη)
06Χειρισμός και καλλιέργεια
- Θρεπτικό μέσο
- DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
- Ατμόσφαιρα επώασης
37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.
- Συμπληρώματα
- Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
- Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
- Accutase
- Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
- Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
- Ανανέωση υγρών
- 2 έως 3 φορές την εβδομάδα
- Απόψυξη και καλλιέργεια
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση
- Στειρότητα
Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.
Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.
- Μέσο κατάψυξης
- Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
- Συνθήκες αποθήκευσης
Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.
- Όροι αποστολής
Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.
08Δωρητής
- Ηλικία δωρητή
- 30 χρόνια
- Εθνικότητα
- Αφροαμερικανός
09Νομικά θέματα και ασφάλεια
- Μέτρα ασφαλείας
- Όταν σχεδιάζετε να αποθηκεύσετε ένα κρυοφιαλίδιο σε υγρό άζωτο για μελλοντική απόψυξη, είναι υποχρεωτικό να τηρείτε αυστηρά μέτρα ασφαλείας. Τα κατάλληλα προστατευτικά γάντια και ο κατάλληλος προστατευτικός ρουχισμός είναι απαραίτητα, ενώ απαιτείται η χρήση μάσκας προσώπου ή γυαλιών ασφαλείας κατά τη μεταφορά κατεψυγμένων δειγμάτων προς ή από τη δεξαμενή υγρού αζώτου. Αυτό γίνεται για να μετριαστεί ο κίνδυνος τραυματισμού από πιθανές εκρήξεις κρυοσωλήνων κατά την απομάκρυνση, οι οποίες μπορεί να οδηγήσουν στην προβολή αιχμηρών θραυσμάτων.
- Εγγύηση
Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος
Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης
- Ισχύουν συμφωνίες με τρίτους
- Ναι