
- Vävnad
- Endocervix
- Sjukdom
- Adenocarcinom
- Metastaseringsställe
- Primärtumörens lokalisation (endocervix)
- Synonymer
- HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP #16, HK CRISPR CAP-D3-mEGFP
Dokument
HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP
Cell line · Produktnummer 301573
Cellinjen HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP är genetiskt modifierad för avancerad cellforskning. Den härstammar från Hela Kyoto-celler och utnyttjar CRISPR/Cas9-teknik...
Anpassning / Rekommendationer
- HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFPCell line€800.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
Cellinjen HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP är genetiskt framtagen för avancerad cellulär forskning. Den härstammar från Hela Kyoto-celler och använder CRISPR/Cas9-teknik för att märka CAP-D3-genen med monomert Enhanced Green Fluorescent Protein (mEGFP). CAP-D3 är avgörande för kromosomal organisation och segregering under celldelning. MEGFP-märkningen möjliggör visualisering av CAP-D3-dynamiken i realtid.
Denna cellinje är ett värdefullt verktyg för att studera kromosomernas stabilitet och integritet, i synnerhet vid sjukdomar som cancer. Den fluorescerande taggen möjliggör högupplösta live-cellavbildningar och detaljerad analys av CAP-D3 under cellcykeln. Forskare kan använda den här modellen för studier av proteinlokalisering och molekylära interaktionsanalyser.
- Vävnad
- Endocervix
- Sjukdom
- Adenocarcinom
- Metastaseringsställe
- Primärtumörens lokalisation (endocervix)
- Ansökningar
- Biologi kring Condensin II-komplexet; avbildning av CAP-D3-subenheten; kromosomorganisation och -segregation; mitotisk dynamik; avbildning av levande celler; högupplöst fluorescensmikroskopi; validering av CRISPR-knock-in
- Synonymer
- HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP #16
- HK CRISPR CAP-D3-mEGFP
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Kvinna
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- GMO-status
- GMO-S1
- Detaljer om GMO-status
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a CRISPR-engineered mEGFP insertion at the CAP-D3 locus for condensin studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande celler med mosaikstensform
- Celltyp
- Epiteliala celler
04Identifierare
- Källa
- HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP (Cytion katalognummer 301573)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_UR44
- Insättare
- Ellenberg-laboratoriet (EMBL)
05Uttryck och mottaglighet
- Produkter
- EGFP (förstärkt grönt fluorescerande protein)
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- 30 år
- Etnicitet
- Afroamerikan
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal med tredje part gäller
- Ja