
- Audums
- Endocervix
- Slimība
- Adenokarcinoma
- Metastāžu vieta
- Primārā audzēja lokalizācija (endocervix)
- Sinonīmi
- HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP #16, HK CRISPR CAP-D3-mEGFP
Dokumenti
HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP
Cell line · Preces numurs 301573
Šūnu līnija HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP ir ģenētiski modificēta, lai veiktu padziļinātus šūnu pētījumus. Tā ir atvasināta no Hela Kyoto šūnām, un tajā tiek izmantota CRISPR/Cas9 tehnoloģija...
Pielāgošana / Ieteikumi
- HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFPCell line€800.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP šūnu līnija ir ģenētiski izstrādāta moderniem šūnu pētījumiem. Tā iegūta no Hela Kyoto šūnām, izmantojot CRISPR/Cas9 tehnoloģiju, lai marķētu CAP-D3 gēnu ar monomēru uzlaboto zaļo fluorescējošo proteīnu (mEGFP). CAP-D3 ir ļoti svarīgs hromosomu organizācijai un segregācijai šūnu dalīšanās laikā. MEGFP marķējums ļauj reāllaikā vizualizēt CAP-D3 dinamiku.
Šī šūnu līnija ir vērtīgs rīks hromosomu stabilitātes un integritātes izpētei, jo īpaši tādu slimību gadījumā kā vēzis. Fluorescējošais marķējums ļauj veikt augstas izšķirtspējas dzīvās šūnas attēlveidošanu un detalizētu CAP-D3 analīzi šūnu cikla laikā. Pētnieki var izmantot šo modeli proteīnu lokalizācijas pētījumiem un molekulārās mijiedarbības analīzēm.
- Audums
- Endocervix
- Slimība
- Adenokarcinoma
- Metastāžu vieta
- Primārā audzēja lokalizācija (endocervix)
- Pieteikumi
- Condensin II kompleksa bioloģija; CAP-D3 apakšvienības attēlveidošana; hromosomu organizācija un segregācija; mitotiskā dinamika; dzīvo šūnu attēlveidošana; augstas izšķirtspējas fluorescences mikroskopija; CRISPR „knock-in” validācija
- Sinonīmi
- HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP #16
- HK CRISPR CAP-D3-mEGFP
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- ĢMO statuss
- GMO-S1
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a CRISPR-engineered mEGFP insertion at the CAP-D3 locus for condensin studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlijveidīgas šūnas ar mozaīkveida akmens formu
- Šūnu tips
- Epitēlija šūnas
04Identifikatori
- Atsauce
- HK-CRISPR-CAP-D3-mEGFP (Cytion kataloga numurs 301573)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_UR44
- noguldītājs
- Ellenberga laboratorija (EMBL)
05Pazīmes un uzņēmība
- Produkti
- EGFP (uzlabots zaļais fluorescējošais proteīns)
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 30 gadi
- Etniskā piederība
- Afroamerikānis
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Tiek piemēroti līgumi ar trešajām personām
- Jā