Μετάβαση στο περιεχόμενο
WT-CLS1
Ιστός
Νεφρός
Ασθένεια
Ραβδοειδής όγκος
Συνώνυμα
CLS1

Έγγραφα

WT-CLS1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300379

Η κυτταρική σειρά WT-CLS1 δημιουργήθηκε από πρωτογενή όγκο του Wilms από τον CLS το 1998. Ωστόσο, τα κύτταρα παρουσιάζουν ραβδοειδή χαρακτηριστικά, όπως απέδειξε ο E. Kun...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Η κυτταρική σειρά WT-CLS1 δημιουργήθηκε από έναν πρωτοπαθή όγκο του Wilms από την CLS το 1998. Ωστόσο, τα κύτταρα έχουν ραβδωτά χαρακτηριστικά, όπως κατέδειξαν οι E. Kunce Stroup et al. το 2017. Τα κύτταρα WT-CLS1 είναι ευαίσθητα στον miR-16, με αποτέλεσμα να μειώνεται η έκφραση των γονιδίων της κυκλίνης D. Επιπλέον, τα κύτταρα παρουσίασαν μοναδική αντίσταση στην αναστολή του IGF1R, σε αντίθεση με τα πραγματικά κύτταρα του όγκου του Wilm.
Ιστός
Νεφρός
Ασθένεια
Ραβδοειδής όγκος
Συνώνυμα
  • CLS1

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Τύπος κυττάρου
Β λεμφοβλάστη
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια. Σχηματίζει όγκο με μικρά κύτταρα που συνάδουν με τον όγκο του Wilms (τα ξενομοσχεύματα μπορεί να μην αντιπροσωπεύουν πλήρως τους όγκους του Wilms, βλ. E. Kunce Stroup 2017)

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
WT-CLS1 (αριθμός καταλόγου Cytion 300379)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_5904

05Έκφραση και ευαισθησία

Προφίλ μεταλλάξεων
Κατάσταση μετάλλαξης WT1: άγριος τύπος, κατάσταση μετάλλαξης CTNNB1: άγριος τύπος, χωρίς LOH.
Ιοί
HIV-1: αρνητικό, HBV: αρνητικό, HCV: αρνητικό

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
IMDM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 3,024 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820800a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 x 105 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
Κάθε 3 έως 4 ημέρες
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
5 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος