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WT-CLS1
ティッシュ
腎臓
病気
ラブドイド腫瘍
同義語
CLS1

WT-CLS1

Cell line · 製品番号 300379

WT-CLS1細胞株は、1998年にCLSによって原発性ウィルムス腫瘍から樹立された。しかし、E. Kunらが示したように、この細胞にはラブドイド様特徴が認められる...

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01概要

説明
WT-CLS1細胞株は、1998年にCLSによって原発性ウィルムス腫瘍から樹立された。しかし、2017年にE. Kunce Stroupらによって示されたように、この細胞はラブドイドの特徴を有している。WT-CLS1細胞はmiR-16に感受性があり、その結果サイクリンD遺伝子の発現が低下する。さらにこの細胞は、真のウィルム腫瘍細胞とは対照的に、IGF1R阻害に対して特異的な抵抗性を示した。
ティッシュ
腎臓
病気
ラブドイド腫瘍
同義語
  • CLS1

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
細胞の種類
Bリンパ芽球
腫瘍形成性
はい、ヌードマウスで。ウィルム腫瘍と一致する小細胞の腫瘍を形成する(異種移植片はウィルム腫瘍を完全に表現していない可能性がある、E. Kunce Stroup 2017を参照)。

04識別子

引用
WT-CLS1 (Cytion カタログ番号 300379)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_5904

05発現と感受性

変異プロファイル
WT1変異の状態:野生型、CTNNB1変異の状態:野生型、LOHなし。
ウイルス
HIV-1:陰性、HBV:陰性、HCV:陰性

06取り扱いと飼育

培地
IMDM, w: 4.5 g/L グルコース, w: 4 mM L-グルタミン, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM ピルビン酸ナトリウム, w: 3.024 g/L NaHCO3 (Cytion article number 820800a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1~3×10⁵細胞/cm²
流体の更新
3~4日ごと
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
5年
民族
白人