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BHK-21 clone 13
Pañuelo de papel
Riñón
Sinónimos
BHK 21, BHK21, Baby Hamster Kidney-21, Baby Hamster Kidney 21, Baby Hamster Kidney from litter No. 21, BHK

Documentos

BHK-21 clone 13

Cell line · Número de producto 603126

BHK-21 clone 13 cells, a subline of the baby hamster kidney (BHK) cell line, have become a pivotal model in virology and molecular biology research due to...

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01Información general

Descripción

Las células BHK-21 clon 13, una sublínea de la línea celular de riñón de hámster bebé (BHK), se han convertido en un modelo fundamental en la investigación en virología y biología molecular debido a su robustez, facilidad de cultivo y alta eficacia de transfección. Las células se utilizan en el estudio de la infección vírica, la producción de antígenos y la síntesis de proteínas recombinantes.

Las células BHK-21 son sensibles a una amplia gama de virus, incluidos alfavirus, flavivirus y rabdovirus, lo que las ha convertido en una herramienta inestimable para el estudio de la replicación viral, la patogénesis y el desarrollo de vectores virales para terapia génica y vacunas. Su utilidad en la investigación vírica se ve reforzada por su capacidad para producir virus a títulos elevados, lo que facilita el estudio de las interacciones virus-huésped y el cribado de compuestos antivirales.

Las células BHK-21 también se utilizan en la producción de proteínas recombinantes debido a su alta eficiencia de transfección. Esta característica permite su utilidad para la producción de proteínas terapéuticas, anticuerpos y para el desarrollo de nuevos productos biotecnológicos.

Las células BHK-21 también sirven de modelo para estudiar procesos celulares como la adhesión celular, la transducción de señales y la apoptosis. Esto tiene implicaciones para comprender los mecanismos de las enfermedades y comprobar la respuesta celular a diversos estímulos, incluidos fármacos y factores ambientales.

En resumen, las células BHK-21 clon 13 constituyen una herramienta fundamental en los campos de la virología, la biología molecular y la biotecnología.

Pañuelo de papel
Riñón
Aplicaciones
Huésped de transfección
Sinónimos
  • BHK 21
  • BHK21
  • Baby Hamster Kidney-21
  • Baby Hamster Kidney 21
  • Baby Hamster Kidney from litter No. 21
  • BHK

02Clasificación

Organismo
Hámster dorado
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Tipo fibroblasto
Tipo de célula
Fibroblastos

04Identificadores

Referencia
BHK-21 clon 13 (número de catálogo de Cytion 603126)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10036
Cellosaurus
CVCL_1914

05Expresión y susceptibilidad

Susceptibilidad a los virus
Adenovirus 25, herpes simple, reovirus 3, estomatitis vesicular (Indiana)
Transcriptasa inversa
Negativo

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2 producirán una capa confluente en aproximadamente 4 días.
Renovación de fluidos
Cada 3 a 5 días
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Recién nacido