Přejít na obsah
BHK-21 clone 13
Tkáň
Ledviny
Synonyma
BHK 21, BHK21, Baby Hamster Kidney-21, Baby Hamster Kidney 21, Baby Hamster Kidney from litter No. 21, BHK

Dokumenty

BHK-21 clone 13

Cell line · Číslo výrobku 603126

BHK-21 clone 13 cells, a subline of the baby hamster kidney (BHK) cell line, have become a pivotal model in virology and molecular biology research due to...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky klonu 13 BHK-21, podlinie buněčné linie baby hamster kidney (BHK), se díky své robustnosti, snadné kultivaci a vysoké účinnosti transfekce staly klíčovým modelem ve virologickém a molekulárně biologickém výzkumu. Buňky se používají při studiu virové infekce, produkce antigenů a syntézy rekombinantních proteinů.

Buňky BHK-21 jsou citlivé k široké škále virů, včetně alfavirů, flavivirů a rhabdovirů, což z nich učinilo neocenitelný nástroj při studiu virové replikace, patogeneze a vývoji virových vektorů pro genovou terapii a vakcíny. Jejich užitečnost ve virovém výzkumu dále zvyšuje jejich schopnost podporovat produkci virů ve vysokém titru, což usnadňuje studium interakcí mezi virem a hostitelem a screening antivirových sloučenin.

Buňky BHK-21 se dále používají při výrobě rekombinantních proteinů díky své vysoké účinnosti transfekce. Tato vlastnost umožňuje jejich využití pro produkci terapeutických proteinů, protilátek a pro vývoj nových biotechnologických produktů.

Buňky BHK-21 také slouží jako model pro studium buněčných procesů, jako je buněčná adheze, přenos signálu a apoptóza. To má význam pro pochopení mechanismů onemocnění a testování buněčné odpovědi na různé podněty, včetně léčiv a faktorů prostředí.

Lze shrnout, že buňky klonu 13 BHK-21 slouží jako důležitý nástroj v oblasti virologie, molekulární biologie a biotechnologie.

Tkáň
Ledviny
Aplikace
Transfekční hostitel
Synonyma
  • BHK 21
  • BHK21
  • Baby Hamster Kidney-21
  • Baby Hamster Kidney 21
  • Baby Hamster Kidney from litter No. 21
  • BHK

02Klasifikace

Organismus
Zlatý křeček
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné
Typ buňky
Fibroblasty

04Identifikátory

Citace
BHK-21 klon 13 (katalogové číslo Cytion 603126)
Daňové identifikační číslo NCBI
10036
Cellosaurus
CVCL_1914

05Exprese a náchylnost

Náchylnost k virům
Adenovirus 25, herpes simplex, reovirus 3, vezikulární stomatitida (Indiana)
Reverzní transkriptáza
Negativní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2 vytvoří konfluentní vrstvu za přibližně 4 dny.
Obnova tekutin
Každých 3 až 5 dní
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Novorozenci