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BHK-21 clone 13
Tecido
Rim
Sinónimos
BHK 21, BHK21, Baby Hamster Kidney-21, Baby Hamster Kidney 21, Baby Hamster Kidney from litter No. 21, BHK

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BHK-21 clone 13

Cell line · Número do produto 603126

BHK-21 clone 13 cells, a subline of the baby hamster kidney (BHK) cell line, have become a pivotal model in virology and molecular biology research due to...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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01Informações gerais

Descrição

As células BHK-21 clone 13, uma sub-linha da linha de células de rim de hamster bebé (BHK), tornaram-se um modelo fundamental na investigação em virologia e biologia molecular devido à sua robustez, facilidade de cultura e elevada eficiência de transfecção. As células são utilizadas no estudo da infeção por vírus, da produção de antigénios e da síntese de proteínas recombinantes.

As células BHK-21 são susceptíveis a uma vasta gama de vírus, incluindo alfavírus, flavivírus e rabdovírus, o que as tornou uma ferramenta inestimável no estudo da replicação viral, da patogénese e do desenvolvimento de vectores virais para terapia genética e vacinas. A sua utilidade na investigação viral é ainda reforçada pela sua capacidade de suportar a produção de vírus de elevado título, facilitando o estudo das interações vírus-hospedeiro e o rastreio de compostos antivirais.

As células BHK-21 são também utilizadas na produção de proteínas recombinantes devido à sua elevada eficiência de transfecção. Esta caraterística permite a sua utilidade para a produção de proteínas terapêuticas, anticorpos e para o desenvolvimento de novos produtos biotecnológicos.

As células BHK-21 também servem de modelo para o estudo de processos celulares como a adesão celular, a transdução de sinais e a apoptose. Isto tem implicações para a compreensão dos mecanismos das doenças e para testar a resposta celular a vários estímulos, incluindo fármacos e factores ambientais.

Em resumo, as células BHK-21 clone 13 constituem uma ferramenta essencial nos domínios da virologia, da biologia molecular e da biotecnologia.

Tecido
Rim
Aplicações
Hospedeiro de transfecção
Sinónimos
  • BHK 21
  • BHK21
  • Baby Hamster Kidney-21
  • Baby Hamster Kidney 21
  • Baby Hamster Kidney from litter No. 21
  • BHK

02Classificação

Organismo
Hamster dourado
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo fibroblastos
Tipo de célula
Fibroblastos

04Identificadores

Referência
BHK-21 clone 13 (Cytion catálogo número 603126)
Número de identificação fiscal do NCBI
10036
Cellosaurus
CVCL_1914

05Expressão e suscetibilidade

Susceptibilidade ao vírus
Adenovírus 25, herpes simplex, reovírus 3, estomatite vesicular (Indiana)
Transcriptase reversa
Negativo

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm² produzirá uma camada confluente em cerca de 4 dias
Renovação de fluidos
A cada 3 a 5 dias
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
Recém-nascido