Pāriet uz saturu
BHK-21 clone 13
Audums
Nieres
Sinonīmi
BHK 21, BHK21, Baby Hamster Kidney-21, Baby Hamster Kidney 21, Baby Hamster Kidney from litter No. 21, BHK

Dokumenti

BHK-21 clone 13

Cell line · Preces numurs 603126

BHK-21 clone 13 cells, a subline of the baby hamster kidney (BHK) cell line, have become a pivotal model in virology and molecular biology research due to...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

BHK-21 klona 13 šūnas, kas ir mazā kāmja nieru (BHK) šūnu līnijas apakšlīnija, ir kļuvušas par galveno modeli virusoloģijas un molekulārās bioloģijas pētījumos, jo tās ir izturīgas, viegli kultivējamas un ar augstu transfekcijas efektivitāti. Šūnas izmanto vīrusu infekcijas, antigēnu ražošanas un rekombinantu proteīnu sintēzes pētījumos.

BHK-21 šūnas ir jutīgas pret plašu vīrusu klāstu, tostarp pret alfavīriem, flavivīriem un rabdovīriem, tāpēc tās ir kļuvušas par nenovērtējamu instrumentu vīrusu replikācijas, patoģenēzes un gēnu terapijas un vakcīnu vīrusu vektoru izstrādē. To lietderību vīrusu pētniecībā vēl vairāk palielina to spēja nodrošināt vīrusu veidošanos lielā titrā, kas atvieglo vīrusa un saimnieka mijiedarbības izpēti un pretvīrusu savienojumu skrīningu.

BHK-21 šūnas tiek izmantotas arī rekombinantu proteīnu ražošanā, jo tām ir augsta transfekcijas efektivitāte. Šī īpašība ļauj tās izmantot terapeitisko proteīnu, antivielu ražošanā un jaunu biotehnoloģisko produktu izstrādē.

BHK-21 šūnas kalpo arī kā modelis šūnu procesu, piemēram, šūnu adhēzijas, signālu pārneses un apoptozes, izpētei. Tas ir svarīgi, lai izprastu slimību mehānismus un pārbaudītu šūnu reakciju uz dažādiem stimuliem, tostarp zālēm un vides faktoriem.

Kopumā BHK-21 klona 13 šūnas kalpo kā svarīgs instruments virusoloģijas, molekulārās bioloģijas un biotehnoloģijas jomās.

Audums
Nieres
Pieteikumi
Transfekcijas saimnieks
Sinonīmi
  • BHK 21
  • BHK21
  • Baby Hamster Kidney-21
  • Baby Hamster Kidney 21
  • Baby Hamster Kidney from litter No. 21
  • BHK

02Klasifikācija

Organisms
Zelta kāmītis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblasti

04Identifikatori

Atsauce
BHK-21 klons 13 (Cytion kataloga numurs 603126)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10036
Cellosaurus
CVCL_1914

05Pazīmes un uzņēmība

Jutība pret vīrusiem
Adenovīruss 25, herpes simplex, reovīruss 3, vezikulārais stomatīts (Indiana)
Reversā transkriptāze
Negatīvs

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 veidos konfluentu slāni apmēram 4 dienu laikā.
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 līdz 5 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Jaundzimušais