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BHK-21 clone 13
Tessuto
Rene
Sinonimi
BHK 21, BHK21, Baby Hamster Kidney-21, Baby Hamster Kidney 21, Baby Hamster Kidney from litter No. 21, BHK

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BHK-21 clone 13

Cell line · Codice prodotto 603126

BHK-21 clone 13 cells, a subline of the baby hamster kidney (BHK) cell line, have become a pivotal model in virology and molecular biology research due to...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule BHK-21 clone 13, una sottoclasse della linea cellulare del rene di criceto (BHK), sono diventate un modello fondamentale nella ricerca virologica e di biologia molecolare grazie alla loro robustezza, facilità di coltura ed elevata efficienza di trasfezione. Le cellule sono utilizzate nello studio dell'infezione virale, della produzione di antigeni e della sintesi di proteine ricombinanti.

Le cellule BHK-21 sono sensibili a un'ampia gamma di virus, tra cui alphavirus, flavivirus e rabdovirus, il che le ha rese uno strumento prezioso per lo studio della replicazione virale, della patogenesi e dello sviluppo di vettori virali per la terapia genica e i vaccini. La loro utilità nella ricerca virale è ulteriormente rafforzata dalla capacità di supportare la produzione di virus ad alto titolo, facilitando lo studio delle interazioni virus-ospite e lo screening di composti antivirali.

Le cellule BHK-21 sono inoltre utilizzate nella produzione di proteine ricombinanti grazie alla loro elevata efficienza di trasfezione. Questa caratteristica le rende utili per la produzione di proteine terapeutiche, anticorpi e per lo sviluppo di nuovi prodotti biotecnologici.

Le cellule BHK-21 sono anche un modello per lo studio di processi cellulari come l'adesione cellulare, la trasduzione del segnale e l'apoptosi. Ciò ha implicazioni per la comprensione dei meccanismi patologici e per testare la risposta cellulare a vari stimoli, tra cui farmaci e fattori ambientali.

In sintesi, le cellule BHK-21 clone 13 sono uno strumento fondamentale nei campi della virologia, della biologia molecolare e della biotecnologia.

Tessuto
Rene
Applicazioni
Ospite di trasfezione
Sinonimi
  • BHK 21
  • BHK21
  • Baby Hamster Kidney-21
  • Baby Hamster Kidney 21
  • Baby Hamster Kidney from litter No. 21
  • BHK

02Classificazione

Organismo
Criceto dorato
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile a un fibroblasto
Tipo di cellula
Fibroblasti

04Identificatori

Riferimento bibliografico
BHK-21 clone 13 (numero di catalogo Cytion 603126)
Codice fiscale NCBI
10036
Cellosaurus
CVCL_1914

05Espressione e suscettibilità

Suscettibilità ai virus
Adenovirus 25, herpes simplex, reovirus 3, stomatite vescicolare (Indiana)
Trascriptasi inversa
Negativo

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2 produrrà uno strato confluente in circa 4 giorni
Rinnovo dei fluidi
Ogni 3-5 giorni
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
Neonato