Mine otse sisu juurde
BHK-21 clone 13
Kude
Neerud
Sünonüümid
BHK 21, BHK21, Baby Hamster Kidney-21, Baby Hamster Kidney 21, Baby Hamster Kidney from litter No. 21, BHK

Dokumendid

BHK-21 clone 13

Cell line · Toote number 603126

BHK-21 clone 13 cells, a subline of the baby hamster kidney (BHK) cell line, have become a pivotal model in virology and molecular biology research due to...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

BHK-21 kloon 13 rakud, mis on beebihamsteri neerude (BHK) rakuliini alamliin, on muutunud oluliseks mudeliks viroloogia ja molekulaarbioloogia uuringutes nende vastupidavuse, kerge kasvatatavuse ja kõrge transfektsiooni tõhususe tõttu. Neid rakke kasutatakse viirusinfektsiooni, antigeeni tootmise ja rekombinantse valgu sünteesi uurimisel.

BHK-21 rakud on tundlikud paljude erinevate viiruste, sealhulgas alfaviiruste, flaviviiruste ja rabdoviiruste suhtes, mis on teinud neist hindamatu abivahendi viiruste replikatsiooni ja patogeneesi uurimisel ning geeniteraapia ja vaktsiinide viirusvektorite väljatöötamisel. Nende kasulikkust viiruste uurimisel suurendab veelgi nende võime toetada kõrge tiitriga viiruste tootmist, mis hõlbustab viiruse ja peremehe vastastikmõju uurimist ja viirusevastaste ühendite sõelumist.

BHK-21 rakke kasutatakse ka rekombinantsete valkude tootmisel, sest nende transfektsioon on väga tõhus. See omadus võimaldab neid kasutada terapeutiliste valkude ja antikehade tootmiseks ning uute biotehnoloogiliste toodete väljatöötamiseks.

BHK-21 rakud on ka mudeliks selliste rakuprotsesside uurimiseks nagu rakkude adhesiivsus, signaaliülekanne ja apoptoos. See aitab mõista haiguste mehhanisme ja testida rakkude reaktsiooni erinevatele stiimulitele, sealhulgas ravimitele ja keskkonnateguritele.

Kokkuvõttes on BHK-21 kloon 13 rakud oluline vahend viroloogia, molekulaarbioloogia ja biotehnoloogia valdkonnas.

Kude
Neerud
Rakendused
Transfektsiooni peremees
Sünonüümid
  • BHK 21
  • BHK21
  • Baby Hamster Kidney-21
  • Baby Hamster Kidney 21
  • Baby Hamster Kidney from litter No. 21
  • BHK

02Klassifikatsioon

Organism
Kuldhamster
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide

04Tunnused

Viide
BHK-21 kloon 13 (Cytioni katalooginumber 603126)
NCBI maksukood
10036
Cellosaurus
CVCL_1914

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirusele vastuvõtlikkus
Adenoviirus 25, herpes simplex, reoviirus 3, vesikulaarstomatiit (Indiana)
Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 moodustab umbes 4 päeva jooksul konfluentse kihi.
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 5 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Vastsündinu