HK-CRISPR-Nup93-mEGFP

HK-CRISPR-Nup93-mEGFP rakuliin on saadud Hela Kyoto rakkudest ja muudetud CRISPR/Cas9 tehnoloogia abil, et ekspresseerida Nup93, mis on fusioonis monomeerse tugevdatud rohelise fluorestseeruva valguga (mEGFP). See võimaldab Nup93 reaalajas visualiseerida tuumakesta sees, aidates uurida tuuma-sütoplasma transporti, tuumapoorikompleksi kokkupanekut ja tuumakesta terviklikkust.

Nup93 on oluline tuumapoorikompleksi arhitektuuri ja funktsiooni säilitamiseks. MEGFP-märgis võimaldab jälgida selle dünaamikat ja interaktsioone, hõlbustades kõrgresolutsiooniga pildistamistehnikaid, nagu konfokaalmikroskoopia. See rakuliin aitab teadlastel mõista geeniregulatsiooni, nukleotsütoplasma liikumist ja raku stressireaktsioone.

HK-CRISPR-Nup93-mEGFP rakuliin on väärtuslik ressurss rakubioloogia ja tuumapoorikompleksiga seotud haiguste uurimiseks, aidates kaasa võimalike terapeutiliste strateegiate väljatöötamisele, mis on suunatud tuuma transpordi radadele. See on eriti kasulik tuumakesta rolli uurimiseks raku funktsioonis ja patoloogias.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest