HK-CRISPR-Nup93-mEGFP
Cell line · Številka izdelka 300655
The HK-CRISPR-Nup93-mEGFP cell line is derived from Hela Kyoto cells and engineered using CRISPR/Cas9 technology to express Nup93 fused with monomeric enh...
Prilagajanje / Priporočila
- HK-CRISPR-Nup93-mEGFPCell line€800.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
Celična linija HK-CRISPR-Nup93-mEGFP izhaja iz celic Hela Kyoto in je s tehnologijo CRISPR/Cas9 spremenjena tako, da izraža Nup93, združen z monomernim okrepljenim zelenim fluorescenčnim proteinom (mEGFP). To omogoča vizualizacijo Nup93 v realnem času znotraj jedrske ovojnice, kar pomaga pri preučevanju jedrsko-citoplazmatskega transporta, sestavljanja kompleksa jedrskih por in celovitosti jedrske ovojnice.
Nup93 je ključnega pomena za ohranjanje zgradbe in delovanja kompleksa jedrskih por. Oznaka mEGFP omogoča sledenje njegovi dinamiki in interakcijam, kar olajša tehnike slikanja visoke ločljivosti, kot je konfokalna mikroskopija. Ta celična linija pomaga raziskovalcem pri razumevanju regulacije genov, nukleocitoplazemskega prometa in odzivov celic na stres.
Celična linija HK-CRISPR-Nup93-mEGFP je dragocen vir za preučevanje celične biologije in bolezni, povezanih s kompleksom jedrnih por, ter prispeva k potencialnim terapevtskim strategijam, usmerjenim na poti jedrnega transporta. Še posebej je uporabna za raziskovanje vloge jedrske ovojnice pri celičnem delovanju in patologiji.
- Tkivo
- Endocervix
- Bolezen
- Adenokarcinom
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Ženska
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Status GSO
- GMO-S1
- Podrobnosti o statusu GSO
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an mEGFP knock-in at the endogenous Nup93 locus for nuclear pore structural studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelnim celicam podobne celice z obliko mozaičnih kamenčkov
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- HK-CRISPR-Nup93-mEGFP (kataloška številka Cytion 300655)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Vlagatelj
- Laboratorij Ellenberg (EMBL)
05Izražanje in dovzetnost
- Ekspresija beljakovin
- Nup153, mEGFP-oznaka
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Starost darovalca
- 30 let
- Etnična pripadnost
- Afroameričan
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Veljajo pogodbe s tretjimi strankami
- Da
.jpg)