Siirry sisältöön
BJ
Kudos
Esinahka
Synonyymit
FF-WT-BJ, BJ1

Asiakirjat

BJ

Cell line · Tuotenumero 305222

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Vastasyntyneen miehen esinahasta peräisin olevat BJ-solut ovat ihmisen fibroblasteja, jotka ovat sidekudoksen solutyyppi. Niitä käytetään usein biologisessa ja lääketieteellisessä tutkimuksessa niiden lisääntymiskyvyn ja ihmisperäisyyden vuoksi, minkä vuoksi ne ovat merkityksellisiä ihmisen biologian ja sairauksien tutkimisessa.

Ihmisen ihon fibroblasteista peräisin olevia BJ-soluja käytetään ensisijaisesti tutkimuksissa, jotka liittyvät solujen vasteisiin oksidatiiviselle stressille, ja ne auttavat ymmärtämään ikääntymistä, tautimekanismeja ja solujen puolustautumista oksidatiivisia vaurioita vastaan. Solut ovat myös toimiva vaihtoehto hiiren BALB/c 3T3-soluille in vitro -toksikologisissa arvioinneissa, erityisesti neutraalipunanottokokeessa (NRU). Tätä määritystä käytetään laajalti sytotoksisten vaikutusten arvioimiseksi mittaamalla solujen elinkelpoisuutta neutraalipunaväriaineen ottamisen avulla.

Ihmisen esinahan BJ-fibroblastien voimakas telomeraasiaktiivisuuden puuttuminen, joka on riippumaton hTERT:stä, korostaa niiden merkitystä tutkittaessa ennenaikaista vanhenemista, telomeerien pidentymistä ja hyperoksian vaikutuksia telomeerien pituuteen. Ihmisen solulinjoja BJ ja HaCaT käytetään usein yhdessä dermatologisessa tutkimuksessa, koska ne täydentävät toisiaan edustamalla ihon fysiologian keskeisiä näkökohtia. HaCaT-solut, jotka ovat ihmisen keratinosyyttejä, toimivat ihon epidermisen kerroksen mallina, kun taas BJ-solut, jotka ovat peräisin ihmisen fibroblasteista, edustavat ihokerrosta. Tämä yhdistelmä mahdollistaa ihon reaktioiden kattavan tutkimisen sekä epidermis- että dermaalitasolla, mikä tekee niistä korvaamattomia ihon ikääntymisen, haavan paranemisen ja erilaisten hoitojen vaikutusten tutkimisessa ihon terveyteen.

Yhteenvetona voidaan todeta, että BJ-solut, jotka tunnetaan myös nimellä ihmisen BJ-fibroblastit, toimivat monipuolisena mallina biologisessa tutkimuksessa, sillä ne tarjoavat tietoa ympäristöaltistusten, solujen vanhenemisen ja radikaalibiologian vaikutuksista.

Kudos
Esinahka
Synonyymit
  • FF-WT-BJ
  • BJ1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastit
Solutyyppi
Esinahan fibroblastit
Karyotyyppi
BJ-solut säilyttävät normaalin diploidisen karyotyypin. Tietyn populaatiokaksinkertaistumisen jälkeen voi kuitenkin syntyä geneettisistä muutoksista kertova epänormaali karyotyyppi.

04Tunnisteet

Lähdeviite
BJ (Cytionin luettelonumero 305222)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_3653

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisätään väliaineeseen 10 % FBS, 20 ng/ml bFGF
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Alle 1 kuukausi
Etnisyys
Kaukasialainen

09Tuotetiedot

Koostumustaulukko