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B-LCL-CDG2
Tissu
Sang périphérique
Maladie
Troubles congénitaux de la glycosylation

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B-LCL-CDG2

Cell line · Référence du produit 302013

B-LCL-CDG2 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young girl suffering from PMM2-CDG. PMM2-CDG is a rare inborn error of metabolism, whi...

€800.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
1

01Informations générales

Description
B-LCL-CDG2 est une lignée de lymphocytes B transformés par l'EBV, dérivée d'une jeune fille souffrant de PMM2-CDG. PMM2-CDG est une erreur innée rare du métabolisme, qui entraîne une synthèse défectueuse des chaînes d'oligosaccharides glycosylés de nombreuses glycoprotéines tissulaires et sanguines et/ou de glycosphingolipides. La cause principale de la glycosylation défectueuse est basée sur des mutations de l'enzyme phosphomannomutase 2 (PMM2). Il existe deux mutations distinctes du gène PMM2.
Tissu
Sang périphérique
Maladie
Troubles congénitaux de la glycosylation
Applications
Génotypage des effets de la CDG dans les cellules immunitaires, tests fonctionnels (par exemple, antigènes de surface des cellules B), tests de médicaments cytotoxiques, analyse mutationnelle, analyse des mécanismes apoptotiques, typage HLA, impact de la glycosylation défectueuse de glycoprotéines cellulaires distinctes sur diverses fonctions.

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Suspension
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Morphologie
Cellules rondes
Type de cellule
Lymphocyte B

04Identifiants

Référence
B-LCL-CDG2 (numéro de catalogue 302013 de Cytion)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_A9Y1

05Expression et sensibilité

Antigènes de surface
CD60a- (GD3), CD60c- (GD3 7-O-acétylé), CD75s+ lactosaminyl Noligosaccharides sialylés), CD77- (Gb3, globotriaosylcéramide)
Expression des antigènes
CD10-, CD19+, CD20+, CD21+, CD22+, CD23+, CD24+, CD37+m CD38+, CD39+, CD40+, CD53+, CD71+, CD72(+), CD73+, CD74 (+), CD80+, CD81+, CD82+, CD83-, CD84-, CD85+, CD86+, CMH classe I+, CMH classe II+
Virus
Transformant : EBV

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS inactivé à la chaleur
Repiquage
Entretenez les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu. Démarrez les cultures avec une densité de 2 x 105 cellules/ml et maintenez la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 1 x 105 et 5 x 105 cellules/ml pour une croissance optimale.
Renouvellement des fluides
Une fois que la couleur moyenne a viré au jaune
Récupération après le dégel
Moyen
Décongélation et mise en culture

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Enfant
Origine ethnique
Caucasien