Μετάβαση στο περιεχόμενο
B-LCL-CDG2
Ιστός
Περιφερικό αίμα
Ασθένεια
Συγγενείς διαταραχές της γλυκοζυλίωσης

Έγγραφα

B-LCL-CDG2

Cell line · Αριθμός προϊόντος 302013

B-LCL-CDG2 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young girl suffering from PMM2-CDG. PMM2-CDG is a rare inborn error of metabolism, whi...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Το B-LCL-CDG2 είναι μια μετασχηματισμένη από EBV κυτταρική σειρά Β λεμφοκυττάρων που προέρχεται από ένα νεαρό κορίτσι που πάσχει από PMM2-CDG. Το PMM2-CDG είναι ένα σπάνιο εκ γενετής σφάλμα του μεταβολισμού, το οποίο έχει ως αποτέλεσμα την ελαττωματική σύνθεση των γλυκοζυλιωμένων ολιγοσακχαριδικών αλυσίδων πολλών γλυκοπρωτεϊνών των ιστών και του αίματος ή/και των γλυκοφωσφολιπιδίων. Η πρωταρχική αιτία της ελαττωματικής γλυκοζυλίωσης βασίζεται σε μεταλλάξεις στο ένζυμο φωσφομανομουτάση 2 (PMM2). Υπάρχουν δύο διαφορετικές μεταλλάξεις για το γονίδιο PMM2.
Ιστός
Περιφερικό αίμα
Ασθένεια
Συγγενείς διαταραχές της γλυκοζυλίωσης
Εφαρμογές
Γονότυπος των επιδράσεων CDG σε ανοσοκύτταρα, λειτουργικές δοκιμές (π.χ. αντιγόνα επιφάνειας Β κυττάρων), δοκιμές κυτταροτοξικών φαρμάκων, ανάλυση μεταλλάξεων, ανάλυση αποπτωτικών μηχανισμών, HLA-τυποποίηση, επιπτώσεις της ελαττωματικής γλυκοζυλίωσης διαφορετικών κυτταρικών γλυκοπρωτεϊνών σε διάφορες λειτουργίες.

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Αναστολή
Επίπεδο βιοασφάλειας
2

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Στρογγυλά κύτταρα
Τύπος κυττάρου
Λεμφοκύτταρο Β

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
B-LCL-CDG2 (αριθμός καταλόγου Cytion 302013)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_A9Y1

05Έκφραση και ευαισθησία

Επιφανειακά αντιγόνα
CD60a- (GD3), CD60c-(7-O-ακετυλιωμένο GD3), CD75s+ σιαλυλιωμένοι λακτοζαμινυλικοί Νολιγοσακχαρίτες), CD77- (Gb3, σφαιροτριαοσυλκεραμίδιο)
Έκφραση αντιγόνου
CD10-, CD19+, CD20+, CD21+, CD22+, CD23+, CD24+, CD37+m CD38+, CD39+, CD40+, CD53+, CD71+, CD72(+), CD73+, CD74 (+), CD80+, CD81+, CD82+, CD83-, CD84-, CD85+, CD86+, MHC κλάσης I+, MHC κλάσης II+
Ιοί
Μετασχηματιστής: EBV

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το θρεπτικό μέσο με 10% θερμικά αδρανοποιημένο FBS
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Διατηρήστε τις καλλιέργειες προσθέτοντας ή αντικαθιστώντας περιοδικά το μέσο. Ξεκινήστε τις καλλιέργειες με πυκνότητα 2 x 105 κύτταρα/ml και διατηρήστε τη συγκέντρωση των κυττάρων εντός του εύρους 1 x 105 έως 5 x 105 κύτταρα/ml για βέλτιστη ανάπτυξη.
Ανανέωση υγρών
Μόλις το μεσαίο χρώμα μετατραπεί σε κίτρινο
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μεσαίο
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Παιδί
Εθνικότητα
Καυκάσιος