Tartalomra ugrás
B-LCL-CDG2
Szövet
Perifériás vér
Betegség
A glikoziláció veleszületett rendellenességei

Dokumentumok

B-LCL-CDG2

Cell line · Termékszám 302013

B-LCL-CDG2 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young girl suffering from PMM2-CDG. PMM2-CDG is a rare inborn error of metabolism, whi...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás
A B-LCL-CDG2 egy EBV-transzformált B-limfocita sejtvonal, amely egy PMM2-CDG-ben szenvedő fiatal lánytól származik. A PMM2-CDG egy ritka veleszületett anyagcsere-hiba, amely számos szöveti és vérglikoprotein és/vagy glikoszfingolipid glikozilált oligoszacharidláncainak hibás szintézisét eredményezi. A hibás glikoziláció elsődleges oka a foszfomannomutáz 2 (PMM2) enzim mutációin alapul. A PMM2 génnek két különböző mutációja létezik.
Szövet
Perifériás vér
Betegség
A glikoziláció veleszületett rendellenességei
Alkalmazások
A CDG-hatások genotipizálása immunsejtekben, funkcionális vizsgálatok (pl. B-sejt felszíni antigének), citotoxikus gyógyszerek vizsgálata, mutációs elemzés, apoptotikus mechanizmusok elemzése, HLA-típusmeghatározás, különböző sejtglikoproteinek hibás glikozilációjának hatása a különböző funkciókra.

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Kerek cellák
Sejttípus
B-limfocita

04Azonosítók

Hivatkozás
B-LCL-CDG2 (Cytion katalógusszám: 302013)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_A9Y1

05Kifejeződés és fogékonyság

Felszíni antigének
CD60a- (GD3), CD60c- (7-O-acetilált GD3), CD75s+ szialilált laktozaminil-noligoszacharidok), CD77- (Gb3, globotriaozilceramid)
Antigén-expresszió
CD10-, CD19+, CD20+, CD21+, CD22+, CD23+, CD24+, CD37+m CD38+, CD39+, CD40+, CD53+, CD71+, CD72(+), CD73+, CD74 (+), CD80+, CD81+, CD82+, CD83-, CD84-, CD85+, CD86+, MHC I+ osztály, MHC II+ osztály
Vírusok
Transzformáns: EBV

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% hővel inaktivált FBS-szel egészítsük ki
Átültetés
A tenyészeteket a táptalaj rendszeres pótlásával vagy cseréjével tartsa fenn. A tenyészeteket 2 x 105 sejt/ml sűrűséggel indítsa el, és az optimális növekedés érdekében tartsa a sejtkoncentrációt 1 x 105 és 5 x 105 sejt/ml között.
Folyadékcsere
Miután a közepes szín sárgává változott
Az olvadás utáni helyreállás
Közepes
Felolvasztás és tenyésztés

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Gyermek
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi