Gå direkte til indholdet
B-LCL-CDG2
Væv
Perifert blod
Sygdom
Medfødte forstyrrelser i glykosylering

Dokumenter

B-LCL-CDG2

Cell line · Varenummer 302013

B-LCL-CDG2 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young girl suffering from PMM2-CDG. PMM2-CDG is a rare inborn error of metabolism, whi...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse
B-LCL-CDG2 er en EBV-transformeret B-lymfocytcellelinje, som stammer fra en ung pige, der lider af PMM2-CDG. PMM2-CDG er en sjælden medfødt stofskiftefejl, som resulterer i en defekt syntese af glykosylerede oligosakkaridkæder i mange vævs- og blodglykoproteiner og/eller glykosfingolipider. Den primære årsag til defekt glykosylering er baseret på mutationer i enzymet phosphomannomutase 2 (PMM2). Der findes to forskellige mutationer i PMM2-genet.
Væv
Perifert blod
Sygdom
Medfødte forstyrrelser i glykosylering
Anvendelser
Genotypning af CDG-effekter i immunceller, funktionel testning (f.eks. B-celleoverfladeantigener), testning af cytotoksiske lægemidler, mutationsanalyse, analyse af apoptotiske mekanismer, HLA-typning, indvirkning af defekt glykosylering af forskellige cellulære glykoproteiner på forskellige funktioner.

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Runde celler
Celletype
B-lymfocyt

04Identifikatorer

Kildehenvisning
B-LCL-CDG2 (Cytion katalognummer 302013)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_A9Y1

05Udtryk og modtagelighed

Overfladeantigener
CD60a- (GD3), CD60c- (7-O-acetyleret GD3), CD75s+ sialylerede laktosaminyl-noligosakkarider), CD77- (Gb3, globotriaosylceramid)
Antigenudtryk
CD10-, CD19+, CD20+, CD21+, CD22+, CD23+, CD24+, CD37+m CD38+, CD39+, CD40+, CD53+, CD71+, CD72(+), CD73+, CD74 (+), CD80+, CD81+, CD82+, CD83-, CD84-, CD85+, CD86+, MHC-klasse I+, MHC-klasse II+
Vira
Transformant: EBV

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % varmeinaktiveret FBS
Oddyrkning
Vedligehold kulturerne ved regelmæssigt at tilføje eller udskifte mediet. Start kulturerne med en tæthed på 2 x 105 celler/ml, og hold cellekoncentrationen inden for området 1 x 105 til 5 x 105 celler/ml for at opnå optimal vækst.
Væskeudskiftning
Når mellemfarven er blevet til gul
Genopretning efter optøning
Medium
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Barn
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk