.jpg)
B-LCL-CDG2
Cell line · Preces numurs 302013
B-LCL-CDG2 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young girl suffering from PMM2-CDG. PMM2-CDG is a rare inborn error of metabolism, whi...
Pielāgošana / Ieteikumi
- B-LCL-CDG2Cell line€800.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
- B-LCL-CDG2 ir ar EBV transformēta B limfocītu šūnu līnija, kas iegūta no jaunas meitenes, kura slimo ar PMM2-CDG. PMM2-CDG ir reta iedzimta vielmaiņas kļūda, kas izraisa daudzu audu un asins glikoproteīnu un/vai glikofingolipīdu glikozilēto oligosaharīdu ķēžu sintēzes defektu. Galvenais glikozilēšanas defekta cēlonis ir fermenta fosfomanomutāzes 2 (PMM2) mutācijas. PMM2 gēnam ir divas atšķirīgas mutācijas.
- Audums
- Perifērās asinis
- Slimība
- Iedzimti glikozilēšanas traucējumi
- Pieteikumi
- CDG ietekmes genotipēšana imūnšūnās, funkcionālā testēšana (piemēram, B šūnu virsmas antigēni), citotoksisko zāļu testēšana, mutāciju analīze, apoptozes mehānismu analīze, HLA tipu noteikšana, dažādu šūnu glikoproteīnu bojātas glikozilēšanas ietekme uz dažādām funkcijām.
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atsperes
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 2
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Apaļas šūnas
- Šūnu tips
- B limfocīts
04Identifikatori
- Atsauce
- B-LCL-CDG2 (Cytion kataloga numurs 302013)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_A9Y1
05Pazīmes un uzņēmība
- Virsmas antigēni
- CD60a- (GD3), CD60c- (7-O-acetilēts GD3), CD75s+ sialilizēti laktosaminilaligosaharīdi), CD77- (Gb3, globotriaosilceramīds)
- Antigēna ekspresija
- CD10-, CD19+, CD20+, CD21+, CD22+, CD23+, CD24+, CD37+m CD38+, CD39+, CD40+, CD53+, CD71+, CD72(+), CD73+, CD74 (+), CD80+, CD81+, CD82+, CD83-, CD84-, CD85+, CD86+, MHC I klases+, MHC II klases+
- Vīrusi
- Transformants: EBV
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS
- Pārstādīšana
- Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 2 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 1 x 105 līdz 5 x 105 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
- Šķidruma atjaunošana
- Kad vidējā krāsa kļuva dzeltena
- Atgūšanās pēc atkusņa
- Vidēja
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- Bērns
- Etniskā piederība
- Kaukāzietis
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā