B-LCL-CDG2
Cell line · Produktnummer 302013
B-LCL-CDG2 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young girl suffering from PMM2-CDG. PMM2-CDG is a rare inborn error of metabolism, whi...
Anpassning / Rekommendationer
- B-LCL-CDG2Cell line€800.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
- B-LCL-CDG2 är en EBV-transformerad B-lymfocytcellinje som härrör från en ung flicka som lider av PMM2-CDG. PMM2-CDG är ett sällsynt medfött ämnesomsättningsfel som leder till defekt syntes av glykosylerade oligosackaridkedjor i många glykoproteiner och/eller glykosfingolipider i vävnader och blod. Den primära orsaken till den defekta glykosyleringen är mutationer i enzymet fosfomannomutas 2 (PMM2). Det finns två olika mutationer för PMM2-genen.
- Vävnad
- Perifert blod
- Sjukdom
- Medfödda glykosyleringsstörningar
- Ansökningar
- Genotypning av CDG-effekter i immunceller, funktionstestning (t.ex. ytantigener i B-celler), testning av cytotoxiska läkemedel, mutationsanalys, analys av apoptotiska mekanismer, HLA-typning, inverkan av defekt glykosylering av olika cellulära glykoproteiner på olika funktioner.
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Kvinna
- Tillväxtegenskaper
- Upphängning
- Biosäkerhetsnivå
- 2
03Egenskaper
- Morfologi
- Runda celler
- Celltyp
- B-lymfocyt
04Identifierare
- Källa
- B-LCL-CDG2 (Cytion katalognummer 302013)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_A9Y1
05Uttryck och mottaglighet
- Ytantigener
- CD60a- (GD3), CD60c- (7-O-acetylerad GD3), CD75s+ sialylerade laktosaminyl-noligosackarider), CD77- (Gb3, globotriaosylceramid)
- Antigenuttryck
- CD10-, CD19+, CD20+, CD21+, CD22+, CD23+, CD24+, CD37+m CD38+, CD39+, CD40+, CD53+, CD71+, CD72(+), CD73+, CD74 (+), CD80+, CD81+, CD82+, CD83-, CD84-, CD85+, CD86+, MHC klass I+, MHC klass II+
- Virus
- Transformant: EBV
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% värmeinaktiverad FBS
- Vidareodling
- Underhåll odlingarna genom att regelbundet tillsätta eller byta ut odlingsmediet. Starta odlingarna med en densitet på 2 x 105 celler/ml och håll cellkoncentrationen inom intervallet 1 x 105 till 5 x 105 celler/ml för optimal tillväxt.
- Vätskeförnyelse
- När medelfärgen övergått till gult
- Återhämtning efter upptining
- Medium
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- Barn
- Etnicitet
- Kaukasisk
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja
.jpg)