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PtK2
Tissu
Rein
Synonymes
Pt K2 (NBL-5), NBL-5, Pt-K2, PTK-2, Ptk-2, PTK 2, PtK 2, PTK2, Pt K2, Ptk2, Potorous tridactylus Kidney 2

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PtK2

Cell line · Référence du produit 608316

PtK2 cells are an epithelial cell line derived from the kidney of a male long-nosed potoroo, Potorous tridactylis, a marsupial species. These cells are we...

€550.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules PtK2 sont une lignée de cellules épithéliales dérivées du rein d'un potoroo mâle à long nez, Potorous tridactylis, une espèce de marsupial. Ces cellules sont connues pour leur grande taille et leur petit nombre de chromosomes (2n = 12), ce qui les rend particulièrement utiles pour les études cytogénétiques. Grâce à leurs chromosomes facilement visualisables, les cellules PtK2 constituent un excellent modèle pour l'étude de la mitose, du mouvement des chromosomes et des aspects structurels de la division cellulaire. En outre, elles conservent une morphologie plate tout au long du cycle cellulaire, y compris pendant la mitose, ce qui facilite l'observation des processus cellulaires au microscope.

Les cellules PtK2 présentent des profils spécifiques de sensibilité aux virus : elles sont résistantes à l'adénovirus 5, au coxsackievirus B5 et au poliovirus 2, tout en étant sensibles au coxsackievirus A9, aux virus de l'herpès simplex, de la vaccine et de la stomatite vésiculaire. En outre, ces cellules possèdent des filaments intermédiaires composés de kératine, qui contribuent à leur intégrité structurelle. En recherche biomédicale, les cellules PtK2 sont souvent utilisées pour étudier la division cellulaire, les interactions virus-hôte et l'organisation du cytosquelette.

Tissu
Rein
Synonymes
  • Pt K2 (NBL-5)
  • NBL-5
  • Pt-K2
  • PTK-2
  • Ptk-2
  • PTK 2
  • PtK 2
  • PTK2
  • Pt K2
  • Ptk2
  • Potorous tridactylus Kidney 2

02Classification

Organisme
Potoroo
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial

04Identifiants

Référence
PtK2 (numéro de catalogue Cytion 608316)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9310
Cellosaurus
CVCL_0514

05Expression et sensibilité

Sensibilité aux virus
Coxsackievirus A9, herpès simplex, vaccine, stomatite vésiculaire (Ogden)
Résistance aux virus
Adénovirus 5, coxsackievirus B5, poliovirus 2
Transcriptase inverse
Négatif
Produits
Kératine

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 15 % de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Adulte