Preskoči na vsebino
PtK2
Tkivo
Ledvice
Sinonimi
Pt K2 (NBL-5), NBL-5, Pt-K2, PTK-2, Ptk-2, PTK 2, PtK 2, PTK2, Pt K2, Ptk2, Potorous tridactylus Kidney 2

Dokumenti

PtK2

Cell line · Številka izdelka 608316

PtK2 cells are an epithelial cell line derived from the kidney of a male long-nosed potoroo, Potorous tridactylis, a marsupial species. These cells are we...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice PtK2 so epitelijska celična linija, pridobljena iz ledvic samca dolgoprstega potoroo, Potorous tridactylis, vrste močerada. Te celice so znane po svoji veliki velikosti in majhnem številu kromosomov (2n = 12), zaradi česar so še posebej uporabne v citogenetskih študijah. Celice PtK2 so zaradi svoje enostavne vizualizacije kromosomov odličen model za preučevanje mitoze, gibanja kromosomov in strukturnih vidikov celične delitve. Poleg tega ohranjajo ravno morfologijo skozi celični cikel, tudi med mitozo, kar pomaga pri opazovanju celičnih procesov pod mikroskopom.

Celice PtK2 imajo specifične vzorce občutljivosti na viruse: odporne so na adenovirus 5, coxsackievirus B5 in poliovirus 2, občutljive pa na coxsackievirus A9, viruse herpes simpleksa, vakcinije in vezikularnega stomatitisa. Poleg tega imajo te celice vmesne filamente, sestavljene iz keratina, ki prispevajo k njihovi strukturni celovitosti. V biomedicinskih raziskavah se celice PtK2 pogosto uporabljajo pri preučevanju delitve celic, interakcij med virusi in gostitelji ter organizacije citoskeleta.

Tkivo
Ledvice
Sinonimi
  • Pt K2 (NBL-5)
  • NBL-5
  • Pt-K2
  • PTK-2
  • Ptk-2
  • PTK 2
  • PtK 2
  • PTK2
  • Pt K2
  • Ptk2
  • Potorous tridactylus Kidney 2

02Razvrstitev

Organizem
Potoroo
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni

04Identifikatorji

Navajanje vira
PtK2 (kataloška številka Cytion 608316)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9310
Cellosaurus
CVCL_0514

05Izražanje in dovzetnost

Občutljivost na virus
Coxsackievirus A9, herpes simpleks, vakcinije, vezikularni stomatitis (Ogden)
Odpornost proti virusom
Adenovirus 5, coxsackievirus B5, poliovirus 2
Reversna transkriptaza
Negativni
Izdelki
Keratin

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite s 15 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Odrasli