Mine otse sisu juurde
PtK2
Kude
Neerud
Sünonüümid
Pt K2 (NBL-5), NBL-5, Pt-K2, PTK-2, Ptk-2, PTK 2, PtK 2, PTK2, Pt K2, Ptk2, Potorous tridactylus Kidney 2

Dokumendid

PtK2

Cell line · Toote number 608316

PtK2 cells are an epithelial cell line derived from the kidney of a male long-nosed potoroo, Potorous tridactylis, a marsupial species. These cells are we...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

PtK2 rakud on epiteelirakuliin, mis on saadud isase pika ninaga potoroo (Potorous tridactylis) neerudest. Need rakud on tuntud oma suure suuruse ja väikese kromosoomide arvu (2n = 12) poolest, mis teeb need eriti kasulikuks tsütogeneetilistes uuringutes. Tänu kergesti visualiseeritavatele kromosoomidele on PtK2 rakud suurepäraseks mudeliks mitoosi, kromosoomide liikumise ja rakkude jagunemise struktuuriliste aspektide uurimiseks. Lisaks säilitavad nad kogu rakutsükli jooksul, sealhulgas mitoosi ajal, lamedat morfoloogiat, mis aitab rakuprotsesside jälgimist mikroskoopiaga.

PtK2 rakkudel on spetsiifiline viiruste tundlikkus, olles resistentsed adenoviiruse 5, kookoskiiruse B5 ja polioviiruse 2 suhtes, olles samas tundlikud kookoskiiruse A9, herpes simplex'i, vaktsiini ja vesikulaarse stomatiidi viiruste suhtes. Lisaks on neil rakkudel keratiinist koosnevad vahefilamendid, mis aitavad kaasa nende struktuurilisele terviklikkusele. Biomeditsiiniuuringutes kasutatakse PtK2 rakke sageli rakkude jagunemise, viiruse ja peremehe vaheliste interaktsioonide ning tsütoskeleti korralduse uurimisel.

Kude
Neerud
Sünonüümid
  • Pt K2 (NBL-5)
  • NBL-5
  • Pt-K2
  • PTK-2
  • Ptk-2
  • PTK 2
  • PtK 2
  • PTK2
  • Pt K2
  • Ptk2
  • Potorous tridactylus Kidney 2

02Klassifikatsioon

Organism
Potoroo
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
PtK2 (Cytioni katalooginumber 608316)
NCBI maksukood
9310
Cellosaurus
CVCL_0514

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirusele vastuvõtlikkus
Coxsackieviirus A9, herpes simplex, vaktsiinia, vesikulaarne stomatiit (Ogden)
Viirusresistentsus
Adenoviirus 5, kooksackieviirus B5, polioviirus 2
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
Keratiin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada keskkonda 15% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud