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PtK2
Tecido
Rim
Sinónimos
Pt K2 (NBL-5), NBL-5, Pt-K2, PTK-2, Ptk-2, PTK 2, PtK 2, PTK2, Pt K2, Ptk2, Potorous tridactylus Kidney 2

Documentos

PtK2

Cell line · Número do produto 608316

PtK2 cells are an epithelial cell line derived from the kidney of a male long-nosed potoroo, Potorous tridactylis, a marsupial species. These cells are we...

€550.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

As células PtK2 são uma linha de células epiteliais derivadas do rim de um potoroo macho de nariz comprido, Potorous tridactylis, uma espécie de marsupial. Estas células são conhecidas pelo seu grande tamanho e pelo pequeno número de cromossomas (2n = 12), o que as torna particularmente úteis em estudos citogenéticos. Devido aos seus cromossomas facilmente visualizáveis, as células PtK2 servem como um excelente modelo para estudar a mitose, o movimento dos cromossomas e os aspectos estruturais da divisão celular. Além disso, mantêm uma morfologia plana ao longo do ciclo celular, incluindo durante a mitose, o que ajuda na observação de processos celulares sob microscopia.

As células PtK2 apresentam padrões específicos de suscetibilidade a vírus, sendo resistentes ao adenovírus 5, ao coxsackievírus B5 e ao poliovírus 2, enquanto são susceptíveis ao coxsackievírus A9, ao herpes simplex, à vaccinia e aos vírus da estomatite vesicular. Além disso, estas células possuem filamentos intermédios compostos por queratina, que contribuem para a sua integridade estrutural. Na investigação biomédica, as células PtK2 são frequentemente utilizadas no estudo da divisão celular, das interações vírus-hospedeiro e da organização do citoesqueleto.

Tecido
Rim
Sinónimos
  • Pt K2 (NBL-5)
  • NBL-5
  • Pt-K2
  • PTK-2
  • Ptk-2
  • PTK 2
  • PtK 2
  • PTK2
  • Pt K2
  • Ptk2
  • Potorous tridactylus Kidney 2

02Classificação

Organismo
Potoroo
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial

04Identificadores

Referência
PtK2 (número de catálogo Cytion 608316)
Número de identificação fiscal do NCBI
9310
Cellosaurus
CVCL_0514

05Expressão e suscetibilidade

Susceptibilidade ao vírus
Coxsackievirus A9, herpes simplex, vaccinia, estomatite vesicular (Ogden)
Resistência aos vírus
Adenovírus 5, coxsackievírus B5, poliovírus 2
Transcriptase reversa
Negativo
Produtos
Queratina

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 15% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
Adulto