Przejdź do treści
PtK2
Chusteczka
Nerka
Synonimy
Pt K2 (NBL-5), NBL-5, Pt-K2, PTK-2, Ptk-2, PTK 2, PtK 2, PTK2, Pt K2, Ptk2, Potorous tridactylus Kidney 2

Dokumenty

PtK2

Cell line · Numer produktu 608316

PtK2 cells are an epithelial cell line derived from the kidney of a male long-nosed potoroo, Potorous tridactylis, a marsupial species. These cells are we...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki PtK2 są nabłonkową linią komórkową pochodzącą z nerki samca torbacza długonosego, Potorous tridactylis, gatunku torbacza. Komórki te są dobrze znane ze swoich dużych rozmiarów i małej liczby chromosomów (2n = 12), co czyni je szczególnie przydatnymi w badaniach cytogenetycznych. Ze względu na łatwo widoczne chromosomy, komórki PtK2 służą jako doskonały model do badania mitozy, ruchu chromosomów i strukturalnych aspektów podziału komórek. Dodatkowo, zachowują one płaską morfologię przez cały cykl komórkowy, w tym podczas mitozy, co pomaga w obserwacji procesów komórkowych pod mikroskopem.

Komórki PtK2 wykazują specyficzne wzorce podatności na wirusy, będąc odpornymi na adenowirusa 5, coxsackievirus B5 i poliovirus 2, będąc jednocześnie podatnymi na coxsackievirus A9, herpes simplex, vaccinia i wirus pęcherzykowego zapalenia jamy ustnej. Ponadto komórki te posiadają filamenty pośrednie złożone z keratyny, które przyczyniają się do ich integralności strukturalnej. W badaniach biomedycznych komórki PtK2 są często wykorzystywane do badania podziału komórek, interakcji wirus-gospodarz i organizacji cytoszkieletu.

Chusteczka
Nerka
Synonimy
  • Pt K2 (NBL-5)
  • NBL-5
  • Pt-K2
  • PTK-2
  • Ptk-2
  • PTK 2
  • PtK 2
  • PTK2
  • Pt K2
  • Ptk2
  • Potorous tridactylus Kidney 2

02Klasyfikacja

Organizm
Potoroo
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka

04Identyfikatory

Źródło
PtK2 (numer katalogowy Cytion 608316)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9310
Cellosaurus
CVCL_0514

05Ekspresja i podatność

Podatność na wirusy
Coxsackievirus A9, herpes simplex, vaccinia, pęcherzykowe zapalenie jamy ustnej (Ogden)
Odporność na wirusy
Adenowirus 5, wirus Coxsackie B5, wirus polio 2
Transkryptaza odwrotna
Negatywny
Produkty
Keratyna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 15% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
Dorosły