Tartalomra ugrás
DF-1
Szövet
Embrió
Szinonimák
DF1, UMNSAH-DF-1, UMNSAH-DF 1, UMNSAH-DF1, UMNSAH/DF1, UMNSAH/DF#1, Douglas Foster-1, UMNSAH/DF-1

Dokumentumok

DF-1

Cell line · Termékszám 305016

DF-1 cells are a continuous cell line derived from chicken embryonic fibroblasts, specifically from East Lansing Line (ELL-0) chickens. The cell line is n...

€650.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A DF-1 sejtek egy folyamatos sejtvonal, amely csirke embrionális fibroblasztokból, különösen az East Lansing Line (ELL-0) csirkékből származik. A sejtvonal arról nevezetes, hogy nem tartalmaz endogén madárleukózisvírust, amely számos más csirke sejtvonalban gyakori szennyeződés. Ez a tulajdonsága különösen értékessé teszi a DF-1 sejteket a virológiai kutatások számára, különösen a madarakat fertőző vírusok, például a madárinfluenza és a Marek-kór vírusának szaporításával és genetikai manipulációjával kapcsolatos vizsgálatokban.

A virológiai felhasználáson kívül a DF-1 sejteket a sejt- és molekuláris biológiai kutatások különböző területein is használják. Erős növekedési sebességgel és fibroblaszt-szerű morfológiával rendelkeznek, így alkalmasak olyan in vitro kísérletekhez, amelyek stabil madársejt-környezetet igényelnek. Ezek a sejtek fontos szerepet játszanak a génexpressziós vizsgálatokban, különösen a vírusok és más genetikai elemek madárfajokban kifejtett hatásai tekintetében. A genetikai stabilitás és a transzfekcióra való érzékenység szintén kiváló modellé teszi a DF-1-et a génfunkció és -szabályozás ellenőrzött környezetben történő tanulmányozására.

Szövet
Embrió
Szinonimák
  • DF1
  • UMNSAH-DF-1
  • UMNSAH-DF 1
  • UMNSAH-DF1
  • UMNSAH/DF1
  • UMNSAH/DF#1
  • Douglas Foster-1
  • UMNSAH/DF-1

02Osztályozás

Organizmus
Csirke
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblasztok
Daganatképző
Nem

04Azonosítók

Hivatkozás
DF-1 (Cytion katalógusszám: 305016)
NCBI adóazonosító szám
9031
Cellosaurus
CVCL_0570

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
10 napos terhesség