Pāriet uz saturu
DF-1
Audums
Embrijs
Sinonīmi
DF1, UMNSAH-DF-1, UMNSAH-DF 1, UMNSAH-DF1, UMNSAH/DF1, UMNSAH/DF#1, Douglas Foster-1, UMNSAH/DF-1

Dokumenti

DF-1

Cell line · Preces numurs 305016

DF-1 cells are a continuous cell line derived from chicken embryonic fibroblasts, specifically from East Lansing Line (ELL-0) chickens. The cell line is n...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

DF-1 šūnas ir nepārtraukta šūnu līnija, kas iegūta no vistu embrionālajiem fibroblastiem, konkrēti no East Lansing līnijas (ELL-0) cāļiem. Šī šūnu līnija izceļas ar to, ka tajā nav endogēnā putnu leikozes vīrusa, kas ir izplatīts piesārņotājs daudzās citās vistu šūnu līnijās. Šī īpašība padara DF-1 šūnas īpaši vērtīgas virusoloģijas pētījumos, jo īpaši pētījumos, kas saistīti ar putnus inficējošu vīrusu, piemēram, putnu gripas un Mareka slimības vīrusa, pavairošanu un ģenētiskajām manipulācijām.

DF-1 šūnas izmanto ne tikai virusoloģijā, bet arī dažādās šūnu un molekulārās bioloģijas pētniecības jomās. Tām ir stabils augšanas ātrums un fibroblastiem līdzīga morfoloģija, tāpēc tās ir piemērotas in vitro eksperimentiem, kam nepieciešama stabila putnu šūnu vide. Šīs šūnas ir bijušas noderīgas gēnu ekspresijas pētījumos, jo īpaši attiecībā uz vīrusu un citu ģenētisko elementu ietekmi uz putnu sugām. Ģenētiskā stabilitāte un uzņēmība pret transfekciju arī padara DF-1 par lielisku modeli gēnu funkcijas un regulācijas izpētei kontrolētā vidē.

Audums
Embrijs
Sinonīmi
  • DF1
  • UMNSAH-DF-1
  • UMNSAH-DF 1
  • UMNSAH-DF1
  • UMNSAH/DF1
  • UMNSAH/DF#1
  • Douglas Foster-1
  • UMNSAH/DF-1

02Klasifikācija

Organisms
Vistas gaļa
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblasti
Tumorogēns
Nē

04Identifikatori

Atsauce
DF-1 (Cytion kataloga numurs 305016)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9031
Cellosaurus
CVCL_0570

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
10 grūtniecības dienas