Preskoči na vsebino
DF-1
Tkivo
Zarodek
Sinonimi
DF1, UMNSAH-DF-1, UMNSAH-DF 1, UMNSAH-DF1, UMNSAH/DF1, UMNSAH/DF#1, Douglas Foster-1, UMNSAH/DF-1

Dokumenti

DF-1

Cell line · Številka izdelka 305016

DF-1 cells are a continuous cell line derived from chicken embryonic fibroblasts, specifically from East Lansing Line (ELL-0) chickens. The cell line is n...

€650.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice DF-1 so neprekinjena celična linija, pridobljena iz piščančjih embrionalnih fibroblastov, zlasti iz piščancev iz linije East Lansing (ELL-0). Ta celična linija je znana po tem, da nima endogenega virusa aviarne levkoze, ki je pogost kontaminant v številnih drugih celičnih linijah piščancev. Zaradi te lastnosti so celice DF-1 še posebej dragocene za virološke raziskave, zlasti v študijah, ki vključujejo razmnoževanje in genetsko manipulacijo virusov, ki okužijo ptice, kot sta virus aviarne influence in virus Markove bolezni.

Poleg uporabe v virologiji se celice DF-1 uporabljajo na različnih področjih raziskav celične in molekularne biologije. Imajo visoko stopnjo rasti in fibroblastom podobno morfologijo, zaradi česar so primerne za poskuse in vitro, ki zahtevajo stabilno okolje ptičjih celic. Te celice so bile koristne pri študijah izražanja genov, zlasti v zvezi z učinki virusnih in drugih genetskih elementov pri pticah. Zaradi genetske stabilnosti in dovzetnosti za transfekcijo so DF-1 tudi odličen model za preučevanje delovanja in regulacije genov v nadzorovanem okolju.

Tkivo
Zarodek
Sinonimi
  • DF1
  • UMNSAH-DF-1
  • UMNSAH-DF 1
  • UMNSAH-DF1
  • UMNSAH/DF1
  • UMNSAH/DF#1
  • Douglas Foster-1
  • UMNSAH/DF-1

02Razvrstitev

Organizem
Piščanec
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblast
Tumorigeničen
Ne

04Identifikatorji

Navajanje vira
DF-1 (kataloška številka Cytion 305016)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9031
Cellosaurus
CVCL_0570

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
10 dni nosečnosti