Prejsť na obsah
DF-1
Tkanivo
Embryo
Synonymá
DF1, UMNSAH-DF-1, UMNSAH-DF 1, UMNSAH-DF1, UMNSAH/DF1, UMNSAH/DF#1, Douglas Foster-1, UMNSAH/DF-1

Dokumenty

DF-1

Cell line · Číslo výrobku 305016

DF-1 cells are a continuous cell line derived from chicken embryonic fibroblasts, specifically from East Lansing Line (ELL-0) chickens. The cell line is n...

€650.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky DF-1 sú kontinuálnou bunkovou líniou odvodenou z kuracích embryonálnych fibroblastov, konkrétne z kurčiat East Lansing Line (ELL-0). Táto bunková línia sa vyznačuje tým, že neobsahuje endogénny vírus vtáčej leukózy, ktorý je bežným kontaminantom mnohých iných bunkových línií kurčiat. Vďaka tejto vlastnosti sú bunky DF-1 mimoriadne cenné pre virologický výskum, najmä v štúdiách zahŕňajúcich rozmnožovanie a genetickú manipuláciu vírusov, ktoré infikujú vtáky, ako je napríklad vírus vtáčej chrípky a vírus Marekovej choroby.

Okrem použitia vo virológii sa bunky DF-1 využívajú v rôznych oblastiach výskumu bunkovej a molekulárnej biológie. Majú vysokú rýchlosť rastu a morfológiu podobnú fibroblastom, vďaka čomu sú vhodné na experimenty in vitro, ktoré si vyžadujú stabilné prostredie vtáčích buniek. Tieto bunky boli užitočné pri štúdiách expresie génov, najmä pokiaľ ide o účinky vírusových a iných genetických prvkov u vtáčích druhov. Vďaka genetickej stabilite a náchylnosti na transfekciu sú DF-1 tiež vynikajúcim modelom na štúdium funkcie a regulácie génov v kontrolovanom prostredí.

Tkanivo
Embryo
Synonymá
  • DF1
  • UMNSAH-DF-1
  • UMNSAH-DF 1
  • UMNSAH-DF1
  • UMNSAH/DF1
  • UMNSAH/DF#1
  • Douglas Foster-1
  • UMNSAH/DF-1

02Klasifikácia

Organizmus
Kuracie mäso
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblasty
Tumorigenický
Nie

04Identifikátory

Citácia
DF-1 (katalógové číslo Cytion 305016)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9031
Cellosaurus
CVCL_0570

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
10 dní tehotenstva