Μετάβαση στο περιεχόμενο
DF-1
Ιστός
Έμβρυο
Συνώνυμα
DF1, UMNSAH-DF-1, UMNSAH-DF 1, UMNSAH-DF1, UMNSAH/DF1, UMNSAH/DF#1, Douglas Foster-1, UMNSAH/DF-1

Έγγραφα

DF-1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305016

DF-1 cells are a continuous cell line derived from chicken embryonic fibroblasts, specifically from East Lansing Line (ELL-0) chickens. The cell line is n...

€650.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα DF-1 είναι μια συνεχής κυτταρική σειρά που προέρχεται από εμβρυϊκούς ινοβλάστες κοτόπουλου, συγκεκριμένα από κοτόπουλα της γραμμής East Lansing (ELL-0). Η κυτταρική σειρά διακρίνεται για την έλλειψη του ενδογενούς ιού της λεύκωσης των πτηνών, ο οποίος αποτελεί κοινή επιμόλυνση σε πολλές άλλες κυτταρικές σειρές κοτόπουλου. Αυτό το χαρακτηριστικό καθιστά τα κύτταρα DF-1 ιδιαίτερα πολύτιμα για την έρευνα της ιολογίας, ιδίως σε μελέτες που αφορούν τον πολλαπλασιασμό και τη γενετική τροποποίηση ιών που μολύνουν τα πτηνά, όπως ο ιός της γρίπης των πτηνών και ο ιός της νόσου του Μάρεκ.

Εκτός από τη χρήση τους στην ιολογία, τα κύτταρα DF-1 χρησιμοποιούνται σε διάφορους τομείς της έρευνας κυτταρικής και μοριακής βιολογίας. Έχουν ισχυρό ρυθμό ανάπτυξης και μορφολογία που μοιάζει με ινοβλάστη, γεγονός που τα καθιστά κατάλληλα για πειράματα in vitro που απαιτούν σταθερό περιβάλλον κυττάρων πτηνών. Τα κύτταρα αυτά έχουν συμβάλει καθοριστικά σε μελέτες γονιδιακής έκφρασης, ιδίως όσον αφορά τις επιδράσεις ιογενών και άλλων γενετικών στοιχείων σε είδη πτηνών. Η γενετική σταθερότητα και η ευαισθησία στη διαμόλυνση καθιστούν επίσης το DF-1 ένα εξαιρετικό μοντέλο για τη μελέτη της λειτουργίας και της ρύθμισης των γονιδίων σε ελεγχόμενο περιβάλλον.

Ιστός
Έμβρυο
Συνώνυμα
  • DF1
  • UMNSAH-DF-1
  • UMNSAH-DF 1
  • UMNSAH-DF1
  • UMNSAH/DF1
  • UMNSAH/DF#1
  • Douglas Foster-1
  • UMNSAH/DF-1

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Κοτόπουλο
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινοβλάστες
Ογκογόνος
Όχι

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
DF-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 305016)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9031
Κελλοσαύρος
CVCL_0570

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
10 ημέρες κύησης