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Cellule Alab
Tessuto
Seno
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Sede del tumore primario (mammaria)
Sinonimi
AlAb, ALAB, A1Ab, AIAB

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Cellule Alab

Cell line · Codice prodotto 300280

La linea cellulare ALAB è una linea cellulare di adenocarcinoma mammario umano derivata da un tumore al seno. È stata adattata per crescere in vitro, in particolare su collagene...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare ALAB è una linea cellulare di adenocarcinoma mammario umano derivata da un tumore mammario. È stata adattata per crescere in vitro, in particolare su substrati di collagene, il che facilita lo studio del comportamento delle cellule tumorali nei carcinomi mammari. Le cellule ALAB sono utilizzate in particolare nella ricerca sulle proteine che legano il calcio e il collagene (CaBP e CBP, rispettivamente). In queste cellule, le proteine che legano il calcio sono state isolate e analizzate, rivelando una proteina significativa di 38 kDa, strettamente associata alle annessionine, una famiglia di proteine coinvolte in processi cellulari come il traffico di membrana e la trasduzione del segnale.

Una delle proteine chiave identificate nelle cellule ALAB è l'annexina II, una proteina calcio-dipendente che si lega al collagene e svolge un ruolo in varie funzioni cellulari, tra cui l'esocitosi e l'organizzazione citoscheletrica. Gli studi di immunofluorescenza delle cellule ALAB rivelano un pattern granulare perinucleare di espressione dell'annexina II, indicando il suo coinvolgimento nella secrezione proteica e nella differenziazione cellulare. La proteina annexina II di 38 kDa rilevata in queste cellule è anche associata a proprietà di legame con il collagene, che possono essere cruciali per la progressione del tumore e la metastasi, rendendo le ALAB un modello prezioso per lo studio della biologia del tumore mammario e delle interazioni proteiche.

Tessuto
Seno
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Sede del tumore primario (mammaria)
Applicazioni
Ricerca sull'adenocarcinoma mammario; biologia dell'annexina II e delle proteine leganti il calcio; studi sul legame con il collagene; invasione delle cellule tumorali e interazioni con la matrice extracellulare; secrezione proteica; esocitosi; biologia del carcinoma mammario
Sinonimi
  • AlAb
  • ALAB
  • A1Ab
  • AIAB

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
Senza OGM
Dettagli sullo stato degli OGM
No genetic modification; wildtype human breast adenocarcinoma cell line
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cellule epiteliali

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Alab (numero di catalogo Cytion 300280)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_U957

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 5% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Raccogliere le cellule in sospensione in una provetta da 15 ml e lavare delicatamente le cellule aderenti con PBS privo di calcio e magnesio (utilizzare 3-5 ml per le fiasche T25 e 5-10 ml per le fiasche T75). Applicare Accutase (1-2 ml per le beute T25, 2,5 ml per le beute T75) assicurando la copertura completa dello strato cellulare. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 10 minuti. Dopo l'incubazione, unire e centrifugare sia la sospensione che le cellule aderenti. Dopo la centrifugazione, risospendere accuratamente il pellet cellulare e trasferire la sospensione cellulare in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
54 anni
Etnia
Etnia non specificata