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Cellule Capan-2
Tessuto
Pancreas
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
CaPan-2, CAPAN-2, Capan 2, CAPAN 2, Capan2, CAPAN2

Documenti

Cellule Capan-2

Cell line · Codice prodotto 300144

La linea cellulare Capan-2 è una linea cellulare di adenocarcinoma pancreatico umano isolata per la prima volta dal tessuto tumorale pancreatico di un uomo caucasico di 56 anni. Essa...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare Capan-2 è una linea cellulare di adenocarcinoma pancreatico umano isolata per la prima volta dal tessuto tumorale pancreatico di un uomo caucasico di 56 anni. È stata derivata dal sito metastatico nel fegato, indicando la sua origine da un tumore secondario che la rende particolarmente preziosa per la ricerca sui processi metastatici e sulla biologia del cancro del pancreas. Le cellule presentano una morfologia epiteliale e sono state ampiamente utilizzate per studiare il cancro del pancreas, la resistenza ai farmaci e la biologia dei tumori.

Le cellule Capan-2 esprimono una forma mutata dell'omologo dell'oncogene virale del sarcoma del ratto di Kirsten (KRAS), una mutazione comune nel cancro del pancreas, che le rende un modello solido per lo studio della tumorigenesi guidata da KRAS. Inoltre, sono caratterizzate dall'espressione di mutazioni del gene soppressore del tumore p53 e sono state osservate instabilità cromosomiche, caratteristiche fondamentali per la progressione del cancro e la risposta al trattamento. Questa linea cellulare è stata utilizzata in numerosi studi, tra cui quelli che valutano l'efficacia dei chemioterapici, esplorano le vie molecolari della progressione del cancro e sviluppano strategie terapeutiche mirate.

Tessuto
Pancreas
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
  • CaPan-2
  • CAPAN-2
  • Capan 2
  • CAPAN 2
  • Capan2
  • CAPAN2

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Poligonale
Tumorigenico
Sì, in topi nudi. Forma un adenocarcinoma ben differenziato coerente con il carcinoma pancreatico
Stato di ploidia
Aneuploide
Tempo di raddoppio
da 45 a 60 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Capan-2 (numero di catalogo Cytion 300144)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0026

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
P53 negativo
Espressione dell'antigene
Gruppo sanguigno B, Rh+
Isoenzimi
Me-2, 2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Prodotto di frequenza del fenotipo: 0.0004
Profilo mutazionale
Le cellule Capan-2 sono portatrici di una mutazione Kras eterozigote nel codone 12: GGT>GTT
Prodotti
Mucina (apomucina, MUC-1, MUC-2)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucosio, w: Glutammina stabile, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,2 g/L NaHCO3 (articolo Cytion numero 820200a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2 darà luogo a un monostrato confluente entro 7 giorni.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 48 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
56 anni
Etnia
Caucasico