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D341Med
Tessuto
Cervello, cervelletto
Malattia
Medulloblastoma
Sinonimi
D-341 Med, D-341 MED, D-341MED, D341_Med, D341Med, D341MED, D341MD, D-341, D341, Med 341, H341

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D341Med

Cell line · Codice prodotto 305136

The D341 Med cell line was established in 1988 by Friedman et al. from tumor tissue extracted from a 3-year-old boy diagnosed with medulloblastoma. Medull...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare D341 Med è stata creata nel 1988 da Friedman et al. a partire da tessuto tumorale estratto da un bambino di 3 anni con diagnosi di medulloblastoma. Il medulloblastoma è un tumore cerebrale pediatrico altamente maligno che si manifesta prevalentemente nel cervelletto. Questa linea cellulare è fondamentale per la ricerca in quanto proviene da un tipo comune di tumore cerebrale infantile e fornisce approfondimenti sulla biologia e sulla genetica del tumore specifici per i casi pediatrici. D341 Med è stato ampiamente utilizzato in studi volti a comprendere i meccanismi molecolari e cellulari del medulloblastoma, comprese le indagini sulle mutazioni genetiche e le vie di segnalazione che contribuiscono alla tumorigenesi e alla resistenza ai trattamenti.

Oltre al suo ruolo nella ricerca di base, la linea cellulare D341 Med è stata determinante negli studi preclinici per la valutazione di nuovi approcci terapeutici per il medulloblastoma. Il suo profilo genetico, che riflette alterazioni comuni nei tumori umani, la rende un modello eccellente per valutare l'efficacia di potenziali farmaci e nuove strategie terapeutiche. L'uso di D341 Med in questi studi contribuisce a colmare il divario tra la ricerca di laboratorio e l'applicazione clinica, sostenendo lo sviluppo di terapie mirate che potrebbero offrire risultati migliori ai bambini colpiti da questa malattia devastante.

Tessuto
Cervello, cervelletto
Malattia
Medulloblastoma
Sinonimi
  • D-341 Med
  • D-341 MED
  • D-341MED
  • D341_Med
  • D341Med
  • D341MED
  • D341MD
  • D-341
  • D341
  • Med 341
  • H341

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Linfoblasto
Tumorigenico
Sì
Tempo di raddoppio
37 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
D341Med (numero di catalogo Cytion 305136)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0018

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Glutammina sintetasi positiva, enolasi specifica del neurone positiva, proteine acide fibrillari gliali negative, proteina S100 (S-100) negativa, antigene neuroectodermico positivo, riconosciuto dall'anticorpo monoclonale UJ13A

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Subcoltura
Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 1 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
3,5 anni
Etnia
Europeo