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SW-403
Tessuto
Colon
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
SW403, SW 403

Documenti

SW-403

Cell line · Codice prodotto 300350

SW-403 is a human colorectal adenocarcinoma cell line derived from a poorly differentiated tumor. It has been widely used in research on colorectal cancer...

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01Informazioni generali

Descrizione

SW-403 è una linea cellulare di adenocarcinoma colorettale umano derivata da un tumore scarsamente differenziato. È stata ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro del colon-retto, in particolare negli studi sugli effetti degli ormoni gastrointestinali sulla crescita tumorale. In particolare, è stato dimostrato che le cellule SW-403 rispondono alla gastrina e alla pentagastrina, due ormoni gastrointestinali, aumentando la loro proliferazione. Questi ormoni stimolano la crescita attraverso il recettore della gastrina, che è espresso in alcuni tumori del colon-retto. Al contrario, il trattamento con proglumide, un antagonista del recettore della gastrina, inibisce la crescita delle cellule SW-403 sia in vitro che in vivo, suggerendo che la gastrina può avere un ruolo nel promuovere la crescita tumorale in questa linea cellulare.

Oltre agli studi ormonali, le cellule SW-403 sono state utilizzate per studiare gli effetti di vari agenti chemioterapici, come la ciprofloxacina, sulla proliferazione e l'apoptosi delle cellule tumorali. È stato dimostrato che la ciprofloxacina inibisce la sintesi del DNA nelle cellule SW-403 e induce l'apoptosi in modo dose-dipendente. Questo processo comporta la rottura della membrana mitocondriale, l'attivazione delle caspasi 3, 8 e 9 e l'aumento delle proteine pro-apoptotiche come Bax. La capacità della ciprofloxacina di innescare l'apoptosi nelle cellule SW-403 suggerisce il suo potenziale come agente terapeutico aggiuntivo nel trattamento del cancro colorettale.

Nel complesso, SW-403 è un modello utile per esplorare i meccanismi molecolari alla base della crescita del cancro del colon-retto, della sensibilità agli ormoni e dell'apoptosi indotta dalla chemioterapia. La sua risposta agli ormoni gastrointestinali come la gastrina e agli agenti chemioterapici ne evidenzia l'importanza sia nella biologia di base del cancro che nella ricerca sullo sviluppo di farmaci.

Tessuto
Colon
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
  • SW403
  • SW 403

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SW-403 (numero di catalogo Cytion 300350)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0545

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
Antigene del colon 3, positivo. Le cellule sono positive alla cheratina mediante colorazione con immunoperossidasi. CSAp negativo (CSAp-).
Isoenzimi
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Profilo mutazionale
Le cellule SW-403 sono portatrici di una mutazione Kras eterozigote nel codone12: GGT>GTT
Trascriptasi inversa
Negativo
Prodotti
Antigene carcinoembrionale (CEA) 155 ng/10 cellule exp6/10 giorni, cheratina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Ham's F12, w: 1,0 mM di glutammina stabile, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 1,1 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820600a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 1 a 2 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
51 anni
Etnia
Caucasico