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TF-1
Tessuto
Midollo osseo
Malattia
Eritroleucemia
Sinonimi
TF1, MFD-1

Documenti

TF-1

Cell line · Codice prodotto 300434

TF-1 cells are erythroblasts isolated from the bone marrow of a 35-year-old Asian male diagnosed with severe pancytopenia in 1987. These cells are a pivot...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule TF-1 sono eritroblasti isolati dal midollo osseo di un uomo asiatico di 35 anni a cui è stata diagnosticata una grave pancitopenia nel 1987. Queste cellule sono un modello fondamentale per studiare i complessi processi di proliferazione e differenziazione delle cellule progenitrici mieloidi. Come linea cellulare, la TF-1 è molto utilizzata nella ricerca ematologica per comprendere i meccanismi alla base della regolazione del ciclo cellulare e dello sviluppo nei lignaggi mieloidi.

Oltre al loro ruolo primario nella ricerca ematopoietica, le cellule TF-1 sono un sistema robusto per esaminare l'impatto di varie citochine sulla sopravvivenza e sulla crescita cellulare. La loro dipendenza da specifici fattori di crescita, come il fattore di stimolazione delle colonie di granulociti-macrofagi (GM-CSF) e l'interleuchina-3 (IL-3) per la proliferazione, le rende uno strumento eccellente per studiare le vie di segnalazione mediate dalle citochine. Questa caratteristica rende le cellule TF-1 utili anche per valutare l'efficacia di nuovi agenti farmacologici che mirano a modulare queste vie, contribuendo così in modo significativo ai progressi terapeutici nel trattamento dei disturbi mieloidi e di altre malattie correlate.

Tessuto
Midollo osseo
Malattia
Eritroleucemia
Applicazioni
La linea cellulare TF-1 può essere applicata in vari sistemi grazie alla sua reattività a diverse citochine. Rappresentano un buon sistema per studiare la proliferazione e la differenziazione delle cellule progenitrici mieloidi. Sensibili a GM-CSF, IL-3, EPO.
Sinonimi
  • TF1
  • MFD-1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Identificatori

Riferimento bibliografico
TF-1 (numero di catalogo Cytion 300434)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0559

04Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
Le cellule TF-1 non esprimono la glicoforina A o l'anidrasi carbonilica I.

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,1 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Aggiungere al terreno di coltura il 10% di FBS e 5 ng/ml di GM-CSF; per la coltura a lungo termine: IL-3
Subcoltura
Avviare le colture con una densità cellulare di 2 x 105 cellule/ml e mantenerle entro un intervallo compreso tra 1 x 105 e 1 x 106 cellule/ml. Per la subcoltura, trasferire la sospensione cellulare in una nuova fiasca di coltura cellulare pre-riempita con il volume corretto di terreno di coltura fresco.
Densità di semina
> 2 x 105 cellule/ml
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
35 anni
Etnia
Giapponese