Pereiti prie turinio
Audinys
Stemplė
Sinonimai
Het-1A, HET1A, Het1A

Dokumentai

HET-1A

Cell line · Prekės numeris 305270

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HET-1A ląstelių linija yra išvesta iš žmogaus stemplės epitelio ir plačiai naudojama gastroenterologiniuose tyrimuose. Šios ląstelės yra vertingas modelis stemplės fiziologijai ir patologijai tirti, ypač tokių stemplės ligų kaip Bareto stemplė ir stemplės vėžys kontekste. HET-1A ląstelės dažnai naudojamos tiriant ląstelių reakciją į įvairius aplinkos ir mitybos veiksnius, kurie gali turėti įtakos stemplės ligų vystymuisi ir progresavimui.

HET-1A ląstelės pasižymi epitelio morfologija ir išlaiko stemplės epitelio ląstelėms būdingus požymius, įskaitant citokeratinų ir kitų epitelio žymenų raišką. Jos naudojamos tyrimuose, kuriuose daugiausia dėmesio skiriama epitelinių ląstelių biologijai, diferenciacijai ir ląstelių transformacijos mechanizmams. Mokslininkai naudoja HET-1A ląsteles rūgšties ir tulžies refliukso, oksidacinio streso ir uždegimo poveikiui stemplės ląstelėms ištirti, taip suteikdami žinių apie gastroezofaginio refliukso ligos (GERL) patofiziologiją ir galimą jos progresavimą į Bareto stemplę arba stemplės adenokarcinomą. Be to, HET-1A ląstelės naudojamos vertinant įvairių chemoprofilaktikos ir terapijos priemonių poveikį stemplės epitelio sveikatai, todėl jos yra svarbi priemonė, padedanti geriau suprasti ir gydyti stemplės ligas.

Audinys
Stemplė
Sinonimai
  • Het-1A
  • HET1A
  • Het1A

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This human esophageal epithelial cell line (HET-1A) contains an SV40 T-Antigen construct (pRSV-T) delivered via transfection under RSV-LTR control, enabling immortalization. The insert is stably integrated into esophageal epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis
Ląstelių tipas
Epitelinė ląstelė
Tumorogeninis
Ne

04Identifikatoriai

Nuoroda
HET-1A (Cytion katalogo numeris 305270)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_3702

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Citokeratinas
Antigeno ekspresija
SV40 T antigenas
Virusai
Transformantas: Simiano virusas 40 (SV40)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
BEGM bronchų epitelio ląstelių augimo terpė BulletKit (Lonza, Lonza katalogo numeris CC-3170)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
74 metai
Etninė priklausomybė
Afroamerikietis