İçeriğe atla
Doku
Özofagus
Eş anlamlılar
Het-1A, HET1A, Het1A

HET-1A

Cell line · Ürün numarası 305270

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HET-1A hücre hattı insan özofagus epitelinden türetilmiştir ve gastroenterolojik araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücreler, özellikle Barrett özofagusu ve özofagus kanseri gibi özofagus hastalıkları bağlamında özofagusun fizyolojisi ve patolojisini incelemek için değerli bir model sağlar. HET-1A hücreleri genellikle özofagus hastalıklarının gelişimine ve ilerlemesine katkıda bulunabilecek çeşitli çevresel ve diyet faktörlerine karşı hücresel tepkileri araştırmak için kullanılır.

HET-1A hücreleri epitelyal bir morfoloji sergiler ve sitokeratinlerin ve diğer epitelyal belirteçlerin ekspresyonu da dahil olmak üzere özofagus epitel hücrelerinin tipik özelliklerini korur. Epitel hücre biyolojisi, farklılaşma ve hücresel dönüşüm mekanizmalarına odaklanan çalışmalarda kullanılırlar. Araştırmacılar, asit ve safra reflüsü, oksidatif stres ve inflamasyonun özofagus hücreleri üzerindeki etkilerini araştırmak için HET-1A hücrelerini kullanarak gastroözofageal reflü hastalığının (GERD) patofizyolojisi ve Barrett özofagusu veya özofagus adenokarsinomuna potansiyel ilerlemesi hakkında bilgi sağlar. Ayrıca, HET-1A hücreleri çeşitli kemopreventif ve terapötik ajanların özofagus epitel sağlığı üzerindeki etkisini değerlendirmek için kullanılır ve bu da onları özofagus bozukluklarının anlaşılması ve tedavisinin ilerletilmesi için önemli bir araç haline getirir.

Doku
Özofagus
Eş anlamlılar
  • Het-1A
  • HET1A
  • Het1A

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This human esophageal epithelial cell line (HET-1A) contains an SV40 T-Antigen construct (pRSV-T) delivered via transfection under RSV-LTR control, enabling immortalization. The insert is stably integrated into esophageal epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Hücre türü
Epitel hücre
Tümör oluşturucu
Hayır

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HET-1A (Cytion katalog numarası 305270)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_3702

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
Sitokeratin
Antijen ekspresyonu
SV40 T antijeni
Virüsler
Transformant: Simian virüs 40 (SV40)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
BEGM Bronşiyal Epitel Hücre Büyüme Ortamı BulletKit (Lonza'dan, Lonza katalog numarası CC-3170)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
74 yıl
Etnik köken
Afro-Amerikan