Ga naar de inhoud
Weefsel
Slokdarm
Synoniemen
Het-1A, HET1A, Het1A

Documenten

HET-1A

Cell line · Productnummer 305270

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HET-1A cellijn is afgeleid van het humane slokdarmepitheel en wordt veel gebruikt in gastro-enterologisch onderzoek. Deze cellen vormen een waardevol model voor het bestuderen van de fysiologie en pathologie van de slokdarm, met name in de context van slokdarmaandoeningen zoals de slokdarm van Barrett en slokdarmkanker. HET-1A-cellen worden vaak gebruikt om de cellulaire reacties te onderzoeken op verschillende omgevings- en voedingsfactoren die kunnen bijdragen aan de ontwikkeling en progressie van slokdarmaandoeningen.

HET-1A-cellen vertonen een epitheliale morfologie en hebben kenmerken die typisch zijn voor slokdarmepitheelcellen, waaronder de expressie van cytokeratines en andere epitheliale markers. Ze worden gebruikt in onderzoeken naar epitheelcelbiologie, differentiatie en de mechanismen van celtransformatie. Onderzoekers gebruiken HET-1A-cellen om de effecten van zuur- en galreflux, oxidatieve stress en ontsteking op slokdarmcellen te onderzoeken, wat inzicht geeft in de pathofysiologie van gastro-oesofageale refluxziekte (GERD) en de mogelijke progressie naar Barrett-slokdarm of slokdarmadenocarcinoom. Daarnaast worden HET-1A-cellen gebruikt om het effect van verschillende chemopreventieve en therapeutische middelen op de gezondheid van slokdarmepitheel te beoordelen, waardoor ze een belangrijk hulpmiddel zijn voor een beter begrip en behandeling van slokdarmaandoeningen.

Weefsel
Slokdarm
Synoniemen
  • Het-1A
  • HET1A
  • Het1A

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This human esophageal epithelial cell line (HET-1A) contains an SV40 T-Antigen construct (pRSV-T) delivered via transfection under RSV-LTR control, enabling immortalization. The insert is stably integrated into esophageal epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel
Celtype
Epitheelcel
Tumorverwekkend
Geen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HET-1A (Cytion catalogusnummer 305270)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_3702

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Cytokeratine
Antigeenexpressie
SV40 T-antigeen
Virussen
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
BEGM Bronchiale Epitheliale Cel Groeimedium BulletKit (van Lonza, Lonza catalogusnummer CC-3170)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
74 jaar
Etnische afkomst
Afro-Amerikaan