Mine otse sisu juurde
Kude
Söögitoru
Sünonüümid
Het-1A, HET1A, Het1A

Dokumendid

HET-1A

Cell line · Toote number 305270

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HET-1A rakuliin on saadud inimese söögitoru epiteelist ja seda kasutatakse laialdaselt gastroenteroloogilistes uuringutes. Need rakud on väärtuslik mudel söögitoru füsioloogia ja patoloogia uurimiseks, eriti seoses söögitoru haigustega, nagu Barretti söögitoru ja söögitoruvähk. HET-1A rakke kasutatakse sageli selleks, et uurida rakkude reaktsioone erinevatele keskkonna- ja toiduteguritele, mis võivad kaasa aidata söögitoru haiguste arengule ja progresseerumisele.

HET-1A rakkudel on epiteeli morfoloogia ja nad säilitavad söögitoru epiteelirakkudele iseloomulikud omadused, sealhulgas tsütokeratiinide ja muude epiteeli markerite ekspressiooni. Neid kasutatakse uuringutes, mis keskenduvad epiteelirakkude bioloogiale, diferentseerumisele ja rakkude muundumise mehhanismidele. Teadlased kasutavad HET-1A rakke, et uurida happe ja sapi refluksi, oksüdatiivse stressi ja põletiku mõju söögitoru rakkudele, andes ülevaate gastroösofageaalse reflukshaiguse (GERD) patofüsioloogiast ja selle võimalikust arenemisest Barretti söögitoru või söögitoru adenokartsinoomiks. Lisaks kasutatakse HET-1A rakke erinevate kemopreventiivsete ja terapeutiliste ainete mõju hindamiseks söögitoru epiteeli tervisele, mis teeb neist olulise vahendi söögitoru haiguste mõistmise ja ravi edendamiseks.

Kude
Söögitoru
Sünonüümid
  • Het-1A
  • HET1A
  • Het1A

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This human esophageal epithelial cell line (HET-1A) contains an SV40 T-Antigen construct (pRSV-T) delivered via transfection under RSV-LTR control, enabling immortalization. The insert is stably integrated into esophageal epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Rakutüüp
Epiteelirakk
Tuumorigeenne
Ei

04Tunnused

Viide
HET-1A (Cytioni katalooginumber 305270)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_3702

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Tsütokeratiin
Antigeeni ekspressioon
SV40 T antigeen
Viirused
Transformant: simian virus 40 (SV40)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
BEGM Bronhiaalepiteelirakkude kasvukeskkond BulletKit (Lonza, Lonza katalooginumber CC-3170)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
74 aastat
Etniline kuuluvus
Afroameeriklane