Pereiti prie turinio
B-LCL-CDG5
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
EBV transformuota B limfoblastoidinė ląstelių linija (B-LCL); PMM2-CDG (įgimtas glikozilinimo sutrikimas, gautas iš paciento)
Metastazių vieta
Netaikoma (EBV transformuotos B-LCL; be metastazių)

Dokumentai

B-LCL-CDG5

Cell line · Prekės numeris 302016

B-LCL-CDG5 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a patient with PMM2-CDG, a congenital disorder of glycosylation (CDG) caused by mutat...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Pagaminta pagal užsakymą
1

01Bendra informacija

Aprašymas

B-LCL-CDG5 yra EBV transformuota B limfocitų ląstelių linija, gauta iš paciento, sergančio PMM2-CDG - įgimtu glikozilinimo sutrikimu (CDG), kurį sukelia *PMM2* geno mutacijos. Dėl šio sutrikimo sutrinka tinkama glikanų struktūrų sintezė ir prijungimas prie glikoproteinų ir glikolipidų, o tai turi įtakos daugeliui organų sistemų. Dėl fosfomannomutazės 2 (PMM2) trūkumo sutrinka manozės-6-fosfato konversija į manozės-1-fosfatą - kritinis glikozilinimo etapas, dėl kurio atsiranda ląstelių funkcijos defektų ir sisteminių komplikacijų.

B-LCL-CDG5, kaip EBV imortalizuota B ląstelių linija, yra labai svarbus biocheminio ir molekulinio *PMM2* mutacijų poveikio tyrimo modelis. Ši ląstelių linija leidžia mokslininkams tirti glikozilinimo defektus, PMM2 fermentinį aktyvumą ir sutrikdyto glikozilinimo pasekmes ląstelėms. Be to, tai yra platforma, kurioje galima išbandyti galimus gydymo metodus, pavyzdžiui, farmakologinius šaperonus, fermentų stiprinimo terapiją arba substratų papildymo strategijas. B-LCL-CDG5 kartu su kitomis CDG pacientų ląstelių linijomis padeda geriau suprasti PMM2-CDG ir kurti tikslines gydymo galimybes.

Audinys
Periferinis kraujas
Liga
EBV transformuota B limfoblastoidinė ląstelių linija (B-LCL); PMM2-CDG (įgimtas glikozilinimo sutrikimas, gautas iš paciento)
Metastazių vieta
Netaikoma (EBV transformuotos B-LCL; be metastazių)
Paraiškos
CDG poveikio imuninėms ląstelėms genotipo nustatymas, funkciniai tyrimai (pvz., B ląstelių paviršiaus antigenų), citotoksinių vaistų tyrimai. Mutacijų analizė, apoptozės mechanizmų analizė, HLA tipo nustatymas, skirtingų ląstelių glikozilinimo defektų poveikis įvairioms funkcijoms.

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Pakaba
GMO statusas
GMO-S2
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is a risk group 2 pathogen; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Apvalios ląstelės
Ląstelių tipas
B limfocitas

04Identifikatoriai

Nuoroda
B-LCL-CDG5 (Cytion katalogo numeris 302016)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Išraiška ir jautrumas

Virusai
Transformantas: EBV

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % termiškai inaktyvuoto FBS
Subkultūrinis auginimas
Kultūras prižiūrėkite periodiškai papildydami arba keisdami terpę. Kultūras pradėkite su 2 x 105 ląstelių/ml tankiu ir, siekdami optimalaus augimo, palaikykite ląstelių koncentraciją nuo 1 x 105 iki 5 x 105 ląstelių/ml.
Skysčių atnaujinimas
Kai vidutinė spalva tapo geltona
Atkūrimas po atšilimo
Vidutinis
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Etninė priklausomybė
Kaukaziečių