Премини към съдържанието
B-LCL-CDG5
Тъкан
Периферна кръв
Заболяване
EBV-трансформирана B-лимфобластоидна клетъчна линия (B-LCL); PMM2-CDG (вродено нарушение на гликозилирането, получено от пациент)
Място на метастазите
Неприложимо (EBV-трансформирана B-LCL; без метастази)

Документи

B-LCL-CDG5

Cell line · Номер на продукта 302016

B-LCL-CDG5 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a patient with PMM2-CDG, a congenital disorder of glycosylation (CDG) caused by mutat...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

Изработва се по поръчка
1

01Обща информация

Описание

B-LCL-CDG5 е трансформирана с EBV клетъчна линия от В лимфоцити, получена от пациент с PMM2-CDG - вродено разстройство на гликозилирането (CDG), причинено от мутации в гена *PMM2*. Това разстройство нарушава правилния синтез и свързването на гликановите структури към гликопротеините и гликолипидите, като засяга множество органни системи. Недостигът на фосфоманномутаза 2 (PMM2) нарушава превръщането на манозо-6-фосфат в манозо-1-фосфат, критична стъпка в гликозилирането, което води до дефекти в клетъчната функция и системни усложнения.

Като EBV-имортализирана B клетъчна линия, B-LCL-CDG5 служи като важен модел за изучаване на биохимичните и молекулярните ефекти на *PMM2* мутациите. Тази клетъчна линия дава възможност на изследователите да изследват дефектите в гликозилирането, ензимната активност на PMM2 и клетъчните последици от нарушеното гликозилиране. Освен това тя предоставя платформа за тестване на потенциални терапевтични подходи, като например фармакологични шаперони, терапии за подобряване на ензима или стратегии за добавяне на субстрати. B-LCL-CDG5, в комбинация с други клетъчни линии, получени от пациенти с CDG, спомага за напредъка в разбирането на PMM2-CDG и разработването на целеви възможности за лечение.

Тъкан
Периферна кръв
Заболяване
EBV-трансформирана B-лимфобластоидна клетъчна линия (B-LCL); PMM2-CDG (вродено нарушение на гликозилирането, получено от пациент)
Място на метастазите
Неприложимо (EBV-трансформирана B-LCL; без метастази)
Приложения
Генотипиране на ефектите на CDG в имунните клетки, функционално тестване (напр. повърхностни антигени на В-клетките), тестване на цитотоксични лекарства. Мутационен анализ, анализ на апоптотичните механизми, HLA-типизиране, въздействие на дефектното гликозилиране на различни клетъчни гликопротеини върху различни функции.

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Окачване
Статус на ГМО
GMO-S2
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is a risk group 2 pathogen; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
2

03Характеристики

Морфология
Кръгли клетки
Тип клетка
В лимфоцит

04Идентификатори

Източник
B-LCL-CDG5 (каталожен номер 302016 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
Not assigned

05Проява и предразположеност

Вируси
Трансформатор: EBV

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% топлинно активиран FBS
Пресаждане
Поддържайте културите, като периодично добавяте или подменяте средата. Започнете културите с плътност 2 x 105 клетки/ml и поддържайте концентрацията на клетките в диапазона от 1 x 105 до 5 x 105 клетки/ml за оптимален растеж.
Обновяване на течността
След като цветът на средата се промени в жълт
Възстановяване след размразяване
Среден
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Етническа принадлежност
Кавказки