Перейти до вмісту
B-LCL-CDG5
Тканина
Периферична кров
Хвороба
Трансформована вірусом ЕБВ лінія В-лімфобластоїдних клітин (B-LCL); PMM2-CDG (вроджене порушення глікозилювання, отримане від пацієнта)
Місце метастазування
Не застосовується (B-LCL, трансформована вірусом ЕБВ; без метастазів)

Документи

B-LCL-CDG5

Cell line · Номер товару 302016

B-LCL-CDG5 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a patient with PMM2-CDG, a congenital disorder of glycosylation (CDG) caused by mutat...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Виготовляється на замовлення
1

01Загальна інформація

Опис

B-LCL-CDG5 - це трансформована ВЕБ-вірусом лінія клітин В-лімфоцитів, отримана від пацієнта з PMM2-CDG, вродженим порушенням глікозилювання (CDG), спричиненим мутаціями в гені *PMM2*. Це порушення порушує належний синтез та приєднання гліканових структур до глікопротеїнів та гліколіпідів, впливаючи на різні системи органів. Дефіцит фосфоманномутази 2 (PMM2) порушує перетворення маннозо-6-фосфату в маннозо-1-фосфат, що є критичним етапом глікозилювання, призводить до порушення клітинної функції та системних ускладнень.

Як імморталізована EBV лінія В-клітин, B-LCL-CDG5 слугує важливою моделлю для вивчення біохімічних та молекулярних ефектів мутацій *PMM2*. Ця клітинна лінія дозволяє дослідникам вивчати дефекти глікозилювання, ферментативну активність PMM2 та клітинні наслідки порушеного глікозилювання. Крім того, вона забезпечує платформу для тестування потенційних терапевтичних підходів, таких як фармакологічні шаперони, терапія, що підсилює ферменти, або стратегії доповнення субстрату. B-LCL-CDG5 у поєднанні з іншими клітинними лініями, отриманими від пацієнтів з ХГЛ, допомагає поглибити наше розуміння ПММ2-ХГЛ та розробити цілеспрямовані методи лікування.

Тканина
Периферична кров
Хвороба
Трансформована вірусом ЕБВ лінія В-лімфобластоїдних клітин (B-LCL); PMM2-CDG (вроджене порушення глікозилювання, отримане від пацієнта)
Місце метастазування
Не застосовується (B-LCL, трансформована вірусом ЕБВ; без метастазів)
Застосування
Генотипування ефектів CDG в імунних клітинах, функціональне тестування (наприклад, поверхневі антигени В-клітин), тестування цитотоксичних препаратів. Мутаційний аналіз, аналіз апоптотичних механізмів, HLA-типування, вплив дефектного глікозилювання окремих клітинних глікопротеїнів на різноманітні функції.

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Підвіска
Статус ГМО
GMO-S2
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is a risk group 2 pathogen; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
2

03Характеристики

Морфологія
Круглі клітини
Тип клітини
В-лімфоцит

04Ідентифікатори

Посилання
B-LCL-CDG5 (номер за каталогом Cytion 302016)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
Not assigned

05Експресія та сприйнятливість

Віруси
Трансформер: EBV

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% термоінактивованого FBS
Пересадка в нове середовище
Підтримуйте культури, періодично додаючи або замінюючи середовище. Починайте культури з щільністю 2 x 105 клітин/мл і підтримуйте концентрацію клітин в діапазоні від 1 x 105 до 5 x 105 клітин/мл для оптимального росту.
Оновлення рідини
Як тільки середній колір перетворився на жовтий
Відновлення після відлиги
Середній
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Етнічна приналежність
Кавказець