Pāriet uz saturu
MLTC-1
Audums
Testis
Slimība
Peles Leidiga šūnu audzējs
Sinonīmi
mLTC-1, Murine Leydig Tumor Cell line-1

Dokumenti

MLTC-1

Cell line · Preces numurs 305175

The MLTC-1 cell line, derived from murine Leydig tumor cells, retains the hormonal responsiveness of the original tumor. This cell line is particularly va...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MLTC-1 šūnu līnija, kas iegūta no peļu Leidiga audzēja šūnām, saglabā oriģinālā audzēja hormonālo reakciju. Šī šūnu līnija ir īpaši vērtīga steroīduģenēzes un Leidiga šūnu funkciju pētījumiem. MLTC-1 šūnām piemīt galvenās Leidiga šūnu īpašības, tostarp luteinizējošā hormona (LH) receptoru klātbūtne, kas ir ļoti svarīgi testosterona ražošanas stimulēšanai. Šīs šūnas kalpo par stabilu modeli, lai pētītu steroīdu hormonu sintēzi un sekrēciju, jo īpaši testosterona, kam ir nozīmīga loma vīriešu reproduktīvajā fizioloģijā. MLTC-1 šūnas reaģē uz hormonālo ārstēšanu līdzīgi kā sākotnējās audzēja šūnas. Membrānas adenilciklāzes aktivitāti īpaši stimulē ārstēšana ar cilvēka horionisko gonadotropīnu (hCG), luteinizējošo hormonu, holēras toksīnu, nātrija fluorīdu un guanil-5'-ilimidodifosfātu. Turklāt šīs šūnas, reaģējot uz hCG, ražo progesteronu, kas vēl vairāk uzsver to lietderību hormonālās regulācijas un signalizācijas ceļu pētniecībā. MLTC-1 šūnu līniju izmanto arī toksikoloģiskajos pētījumos, lai novērtētu dažādu vielu ietekmi uz Leidiga šūnu funkciju un steroidoģenēzi, padarot to par būtisku reproduktīvās bioloģijas un endokrinoloģijas pētījumu instrumentu.

Audums
Testis
Slimība
Peles Leidiga šūnu audzējs
Sinonīmi
  • mLTC-1
  • Murine Leydig Tumor Cell line-1

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
MLTC-1 (Cytion kataloga numurs 305175)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_3544

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
HcG, luteinizējošais hormons (LH)
Proteīnu ekspresija
Progesterons

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% FBS, pievienojiet 2,5 g/l glikozes un 10 mM HEPES
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6