Ga naar de inhoud
DAN-G-cellen
Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
Dan-G, DanG, DANG

Documenten

DAN-G-cellen

Cell line · Productnummer 300162

De DAN-G-cellijn is afkomstig van een menselijk pancreascarcinoom. Deze wordt op grote schaal gebruikt in onderzoek naar alvleesklierkanker, met name in studies...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De DAN-G-cellijn is afgeleid van een humaan pancreascarcinoom. De lijn wordt veel gebruikt in onderzoek naar alvleesklierkanker, met name in studies naar tumorigenese, metastase en resistentie tegen chemotherapie. Het genetische profiel van DAN-G bevat mutaties in belangrijke oncogenen en tumorsuppressorgenen, die kenmerkend zijn voor pancreasadenocarcinomen. Dit maakt de cellijn tot een waardevol model voor het begrijpen van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan alvleesklierkanker en voor het testen van nieuwe therapeutische strategieën.

Naast de toepassingen in kankeronderzoek is de DAN-G cellijn gebruikt om de cellulaire processen te bestuderen die betrokken zijn bij de progressie van pancreas ductaal adenocarcinoom, waaronder celcyclusregulatie, apoptose en signaaltransductiepaden. De cellen vertonen agressieve in vitro groeikenmerken en kunnen tumoren vormen in immuungecompromitteerde muizen, wat de menselijke ziekte simuleert en een in vivo systeem biedt voor het evalueren van de werkzaamheid van medicijnen tegen kanker. Onderzoekers gebruiken deze cellijn ook om de rol van de tumormicro-omgeving in de progressie van alvleesklierkanker en resistentie tegen therapie te onderzoeken.

Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
  • Dan-G
  • DanG
  • DANG

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen
Verdubbelingstijd
33 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
DAN-G (Cytion catalogusnummer 300162)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0243

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
P53 negatief
Mutatieprofiel
DAN-G cellen dragen een homozygote Kras-mutatie in codon12: GGT(Gly) >GTT(Val)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
3 tot 4 x 104 cellen/cm2 zullen in ongeveer 4 dagen een confluente laag vormen.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
68 jaar