MG-63-cellijn: een uitgebreide gids over MG-63-cellen in het onderzoek naar osteosarcoom

MG-63-cellen zijn fibroblastachtige menselijke osteosarcoomcellen die een breed scala aan onderzoekstoepassingen bieden op biomedisch gebied. Dit omvat onder meer het bestuderen van botgerelateerde processen zoals botontwikkeling, differentiatie, enz. Daarnaast dient de MG-63-cellijn als een geschikt in-vitromodel voor het bestuderen van de levensvatbaarheid, proliferatie en adhesie van botcellen.

Algemene kenmerken en oorsprong van de MG-63-cellijn

In dit deel van het artikel komen de oorsprong en de algemene kenmerken van de MG-63-cellijn aan bod. U leert: Wat is de MG-63-cellijn? Wat is de oorsprong van de MG-63-cellijn? Wat is de morfologie van MG-63-cellen? Hoe groot zijn MG-63-cellen?

• MG-63 is een type osteoblastcellijn afkomstig uit het bot van een 14-jarige mannelijke osteosarcoompatiënt (Kaukasisch). A. Billiau en collega’s hebben deze cellijn in 1977 gedeponeerd.
• De MG-63-cellijn heeft een morfologie die lijkt op die van fibroblasten.
• Menselijke osteosarcoomcellen (MG-63) vertonen hypotriploïdie. Het modale chromosoomaantal voor deze cellen is 66, wat voorkomt bij ongeveer 44% van de celpopulatie. Hogere ploidieën worden ook gemeld bij bijna 2% van de celpopulatie. Bovendien zijn 18-19 markerchromosomen in alle cellen overvloedig aanwezig.

SEM-opnames van een sarcoomcelkweek.

Informatie over het kweken van de MG-63-cellijn

Belangrijke informatie over de kweekvereisten van de cellijn kan uw werk vergemakkelijken. In dit gedeelte van het artikel worden alle belangrijke punten opgesomd die cruciaal zijn voor het kweken en onderhouden van MG-63-cellen. Hier leert u: Wat is de verdubbelingstijd van MG-63-cellen? Welk groeimedium wordt gebruikt voor MG-63-cellen? Wat is de bezaaidichtheid van MG-63-cellen?

Belangrijke punten voor het kweken van MG-63-cellen

Verdubbelingstijd

De verdubbelingstijd van de MG-63-celpopulatie ligt tussen de 28 en 38 uur, afhankelijk van de kweekomstandigheden.

Groeikenmerken

MG-63 is een hechtende cellijn.

Uitzaaidichtheid

Voor MG-63-cellen wordt een celdichtheid van 1 x 10^⁴ cellen/cm^² aanbevolen. Adhérente cellen worden gewassen met 1x fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) zonder magnesium en calcium. Deze cellen worden vervolgens geïncubeerd met een dissociatieoplossing (Accutase), er wordt vers medium toegevoegd en ze worden gecentrifugeerd. Het verzamelde celpellet wordt opnieuw gesuspendeerd in vers medium en in de nieuwe kolf gedoseerd voor groei.

Groeimedium

DMEM- of Ham’s F12-media worden gebruikt voor het kweken van MG-63-cellen. Deze media kunnen worden aangevuld met 5% foetaal runderserum (FBS), 3,0 g/L glucose, 2,5 mM L-glutamine en 1,2 g/L NaHCO₃ voor optimale celgroei. De media moeten 2-3 keer per week worden ververst.

Kweekomstandigheden

Voor het kweken van MG-63-cellen is een bevochtigde incubator bij een temperatuur van 37 °C en een CO₂-toevoer van 5% vereist.

Opslag

Deze osteoblastachtige cellen kunnen worden bewaard in de dampfase van vloeibare stikstof of bij een temperatuur van minder dan -150 °C om de levensvatbaarheid van de cellen te behouden.

Invriesproces en medium

Voor het invriezen van MG-63-cellen worden CM-1- of CM-ACF-media gebruikt. Over het algemeen wordt een langzaam invriesproces aanbevolen om celschok te voorkomen en de levensvatbaarheid van de cellen te beschermen.

Ontdooiproces

Ingevroren cellen worden 40 tot 60 seconden geïncubeerd in een voorverwarmd waterbad (37 graden Celsius). De cellen worden opnieuw gesuspendeerd in vers groeimedium en in een nieuwe kolf gegoten. Na 24 uur incubatie wordt het medium vervangen om de componenten van het invriesmedium te verwijderen.  

Bioveiligheidsniveau

Voor de hantering en het onderhoud van MG-63-culturen zijn laboratoriumomstandigheden van bioveiligheidsniveau 1 vereist.

MG-63-cellen vóór en na het bereiken van confluentie.

MG-63-cellijn: voor- en nadelen

MG-63 is een veelgebruikte osteoblastcellijn. Deze cellijn kent verschillende voor- en nadelen. Hieronder noemen we enkele belangrijke voor- en nadelen van de MG-63-cellijn.

Voordelen

De voordelen van de MG-63-cellen zijn:

• Osteoblastachtige kenmerken

  De MG-63-cellijn vertoont osteoblastachtige kenmerken, waardoor deze geschikt is voor het bestuderen van botgerelateerde processen en aandoeningen. De cellijn kan ook worden gebruikt om celadhesie, proliferatie en levensvatbaarheid op titaniumoppervlakken te onderzoeken [1].

• Geschiktheid voor transfectie

  MG-63-cellen worden op grote schaal gebruikt in transfectieonderzoeken, waardoor onderzoek naar genexpressie, functie en cellulaire processen mogelijk is.

• Hoge interferonproductie

  MG-63-cellen zijn in staat tot een hoge interferonproductie. Ze kunnen 3,7 keer meer interferon per cm² produceren dan diploïde fibroblasten wanneer ze worden geïnduceerd met cycloheximide, polyinosinezuur-polycytidylzuur en actinomycine [2].

Nadelen

De nadelen van MG-63 B-cellen zijn:

• Heterogeniteit

  MG-63-cellen vertonen heterogeniteit binnen de celpopulatie, wat de reproduceerbaarheid kan beïnvloeden.

• Tumorcellijn

  MG-63 is een kankercellijn en geeft mogelijk geen volledig beeld van het gedrag en de fysiologie van normale cellen, wat de toepassing ervan in bepaalde laboratoriumexperimenten beperkt.

Bestel vandaag nog uw MG-63-cellen

Toepassingen van MG-63-cellen

MG-63-cellen zijn een uitstekend onderzoeksinstrument. Ze bieden tal van veelbelovende toepassingen op onderzoeksgebied. Hieronder worden enkele belangrijke onderzoekstoepassingen van MG-63-cellen opgesomd.

• Onderzoek naar botgerelateerde processen/ziekten: MG-63-cellen zijn osteoblastachtige (botvormende) cellen. Daarom worden deze cellen op grote schaal gebruikt voor het onderzoek naar botziekten en cellulaire processen, waaronder ontwikkeling, differentiatie en mineralisatie. Daarnaast worden de cellen op grote schaal gebruikt voor het screenen van geneesmiddelen ter bevordering van botgenezing. In onderzoek werden MG-63-cellen gebruikt om het therapeutisch potentieel te bestuderen van op milieuvriendelijke wijze gesynthetiseerde zinkoxide-nanodeeltjes uit Scutellaria baicalensis op de proliferatie, mineralisatie en differentiatie van botcellen [3].
• Kankeronderzoek: MG-63-cellen worden op grote schaal gebruikt in kankeronderzoek. In verschillende studies zijn deze osteosarcoomcellen ingezet om kankersignaalroutes te begrijpen en het cytotoxische en therapeutische potentieel van geneesmiddelen te evalueren. In een studie uit 2019 werden de antitumorale eigenschappen van een natuurlijke verbinding, Tomentosin, onderzocht met behulp van MG-63-cellen. De bevindingen toonden aan dat Tomentosin antikankereffecten vertoont door de productie van intracellulaire reactieve zuurstofsoorten (ROS) te stimuleren [4].

Wetenschappelijke publicaties over MG-63-cellen

Hieronder volgen enkele onderzoekspublicaties over MG-63, de osteoblastachtige cellijn.

miR-192 verhoogt de gevoeligheid van de kankercellen van het osteosarcoom (MG-63) voor het geneesmiddel methotrexaat

Dit artikel verscheen in 2020 in het tijdschrift *Pathology - Research and Practice*. In dit onderzoek werden MG-63-cellen gebruikt om de moleculaire mechanismen te bestuderen die een rol spelen bij de resistentie tegen geneesmiddelen in osteosarcoomkankercellen (MG-63). Uit de resultaten bleek dat miRNA-192 een nuttig doelwit zou kunnen zijn om de resistentie tegen methotrexaat bij osteosarcoom te overwinnen.

Groen gesynthetiseerde zinkoxide-nanodeeltjes reguleren de apoptotische expressie in MG-63-botkankercellen

Dit onderzoek is gepubliceerd in het tijdschrift *Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology* (2020). De studie rapporteerde het antikankerpotentieel van groen gesynthetiseerde zinkoxide-nanodeeltjes (ZnONPs) uit *Rehmanniae Radix* tegen botkankercellen (MG-63).

Osteogene differentiatie en mineralisatiepotentieel van zinkoxide-nanodeeltjes uit Scutellaria baicalensis op menselijke osteoblast-achtige MG-63-cellen

Dit onderzoeksartikel is in 2021 gepubliceerd in het tijdschrift Materials Science and Engineering. Deze studie stelde de botgenezende eigenschappen voor van biosynthetisch verkregen zinkoxide-nanodeeltjes uit de Scutellaria baicalensis-plant, waarbij gebruik werd gemaakt van de MG-63-cellijn.

Curcumine remt de proliferatie en invasie van MG-63-cellen door inactivering van de p-JAK2/p-STAT3-route

Deze studie werd in 2021 gepubliceerd in het tijdschrift *Onco Targets and Therapy*. Het onderzoek stelde de antitumorale eigenschappen van de curcumineverbinding tegen osteosarcoomcellen voor. De verbinding oefende deze therapeutische effecten uit door de p-JAK2/p-STAT3-kankersignaalroute te inactiveren.

Invloed van met bioveld behandeld vitamine D3 op de proliferatie, differentiatie en rijping van botgerelateerde parameters in de MG-63-cellijn

Dit onderzoek werd in 2018 gepubliceerd in het International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science. Uit de studie bleek dat met biofield-energie behandelde vitamine D3 een positieve invloed heeft op de proliferatie, rijping en differentiatie van botcellen en de parameters voor botgezondheid verbetert.

Bronnen voor de MG-63-cellijn: protocollen, video’s en meer

Er zijn diverse bronnen beschikbaar over de MG-63-cellijn, waarin de protocollen voor celkweek en transfectie worden toegelicht.

• Transfectie van MG-63-cellen: Deze video geeft een uitgebreide uitleg over het transfectieprotocol voor MG-63-cellen.
• Passeren van hechtende cellen: Deze video biedt een handleiding voor het subcultiveren of passeren van hechtende cellijnen. Hiermee leert u de basisprotocollen voor celkweek.

Via de volgende link vindt u het kweekprotocol voor MG-63-cellen.

• Kweek van MG-63-cellen: Deze website biedt een eenvoudig en gedetailleerd protocol voor het subcultiveren of splitsen van de MG-63-cellijn.

Veelgestelde vragen over MG-63-cellen

Referenties

1. Wandiyanto, J.V., et al., Het lot van osteoblastachtige MG-63-cellen op vooraf geïnfecteerde bacteriedodende nanogestructureerde titaniumoppervlakken. Materials (Basel), 2019. 12(10).
2. Billiau, A., et al., Menselijk interferon: massaproductie in een nieuw opgezette cellijn, MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): p. 11-5.
3. Tang, Y., et al., Osteogeen differentiatie- en mineralisatiepotentieel van zinkoxide-nanodeeltjes uit Scutellaria baicalensis op menselijke osteoblastachtige MG-63-cellen. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: p. 111656.
4. Lee, C.M., et al., Tomentosine vertoont een antikankerverwekkend effect in menselijke MG-63-osteosarcoomcellen via de inductie van intracellulaire reactieve zuurstofsoorten. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): p. 1508.